» Днк enterobacteriaceae норма в мазке: Мазок на флору у женщин. Мазок со слизистой влагалища на чистоту

Содержание

Мазок на флору у женщин норма в таблице

Мазок на флору женщинам назначают для оценки
степени чистоты влагалища, выявления патогенных микроорганизмов. Это такое
исследование, при котором влагалищные выделения наносят на предметное стекло и
смотрят под микроскопом. Расшифровку мазка на флору по заключению лаборанта
проводит гинеколог.

Для чего в гинекологии
назначается мазок на флору

Мазок на флору в гинекологии — стандартный
анализ, который назначают женщинам с профилактической и диагностической целью.
Его делают здоровым женщинам, при наличии жалоб на патологические выделения,
при проведении медицинского осмотра для трудоустройства. Показания ко взятию
вагинального мазка на флору:

  • ежегодный профилактический осмотр
    здоровых женщин;
  • подготовка к ЭКО;
  • подготовка к гинекологическим
    операциям, абортам;
  • планирование беременности;
  • наличие обильных, неприятно
    пахнущих выделений;
  • зуд и жжение при мочеиспускании,
    половом акте.

Сдавать мазок на флору лучше после подготовки,
чтобы результат был максимально достоверным. Подготовка к гинекологическому
мазку включает:

  • отказ от использования вагинальных
    таблеток и свечей за три дня до процедуры;
  • отказ от половых контактов за
    сутки до исследования;
  • отказ от использования интимных
    гелей, мыла, дезодорирующих средств.

Не рекомендуется сдавать мазок из влагалища на фоне лечения антибиотиками, противогрибковыми препаратами. После окончания курса лечения следует подождать две недели, а затем проходить обследование. Анализ не делают во время месячных. Оптимальный период — с 10 по 20 день цикла.

В день посещения гинеколога женщина
подмывается кипячёной водой без мыла. Для взятия материала женщина
располагается на гинекологическом кресле. Выделения со стенок влагалища
собирают стерильным марлевым тампоном. Из уретры и шейки матки слизь берут
ложечкой Фолькмана или цитощеткой. Анализ делается в течение 1-3 дней.

Мазок на флору показывает соотношение
нормальных и патогенных микроорганизмов, количество эпителиальных клеток,
лейкоцитов. По этим данным гинеколог может судить о состоянии здоровья женщины.

Расшифровка мазка на флору

Результаты вагинального мазка на флору
выдаются на специальном бланке. Ответ зашифрован буквами и цифрами. Участки,
откуда берут пробу, обозначаются тремя буквами:

  • С — канал шейки матки;
  • U — мочеиспускательный канал;
  • V — влагалище.

Буквами также обозначают показатели, которые
смотрят в анализе:

  • Le — лейкоциты, клетки,
    появляющиеся при воспалении;
  • Эп — эпителий, поверхностные
    клетки слизистой;
  • Er — эритроциты, в нормальном
    мазке на флору отсутствуют;
  • Gn — гонококки, возбудители
    гонореи;
  • Tr — трихомонады, возбудители
    трихомониаза;
  • Can — грибы рода Кандида,
    возбудители кандидоза.

В бланке прописано количество и характер
слизи, наличие ключевых клеток, смешанной флоры в мазке у женщины. Указывают
соотношение кокковой и бациллярной флоры в мазке.

Мазок на флору изучают под микроскопом, чтобы
определить, какие микроорганизмы там содержатся. Этот процесс называется
бактериоскопия мазка. Количество бактерий обозначают крестами:

  • + — минимальное количество;
  • ++ — умеренное;
  • +++ — высокое;
  • ++++ — очень высокое.

Рядом указывают обозначение «в
п/зр». Это означает, что бактерии обнаружены в том участке, которое видно
в окуляре микроскопа.

Палочки Додерлейна

Мазок на микрофлору нужен для выявления не
только патогенных бактерий, но и нормальной флоры. Палочки Додерлейна в мазке —
это лактобактерии, которые должны составлять основную массу микрофлоры. Кроме
лактобактерий, нормальной палочковой флорой являются также бифидобактерии.

Уменьшение числа палочек свидетельствует о
дисбактериозе влагалища. Лактобактерии обладают защитными свойствами, поэтому
при уменьшении их количества возрастает риск инфекционно-воспалительных
заболеваний влагалища.

Кокковая флора в мазке на флору

Кокковые бактерии имеют округлую форму. К ним
относят стафилококки и стрептококки. Это патогенные микроорганизмы, которые
должны содержаться во влагалище в небольшом количестве. Если их много,
развивается воспаление.

В анализе мазка может выявляться смешанная
флора. Это значит, что есть палочковые и кокковые бактерии. Такое состояние
наблюдается при бактериальном вагинозе.

Эпителий в мазке на флору

В норме на поверхности слизистой влагалища
находится плоский эпителий. При воспалении или повреждении слизистой он
слущивается и обнаруживается под микроскопом. Клетки эпителия в мазке
обозначают буквами Эп и указывают их количество цифрой.

Уменьшение количества эпителия говорит об
атрофии слизистой. Это наблюдается у женщин после менопаузы. Появление вместо
плоского эпителия цилиндрического — признак предракового состояния.

Ключевые клетки в мазке на флору

Ключевые клетки — это отслоившиеся эпителиальные
клетки, на поверхности которых «сидят» мелкие бактерии гарднереллы.
Эти бактерии в большом количестве являются причиной бактериального вагиноза.
Заболевание сопровождается обильными серыми выделениями с неприятным рыбным
запахом, зудом и жжением при мочеиспускании, половом акте.

Грибы

Помимо бактериальной флоры, в анализе могут
быть выявлены грибы. Обычно обнаруживаются грибы рода Кандида. Они вызывают
кандидоз, или молочницу влагалища. Заболевание проявляется обильными
творожистыми выделениями, сильным зудом во влагалище.

Трихомонады

Мазок на флору при бактериоскопическом
исследовании может выявить наличие трихомонад, гонококков. Это бактерии,
вызывающие специфические инфекции мочеполовых путей.

Нормальный результат мазка на
флору

Таблица норм мазка на флору у женщин.

Показатель Уретра Влагалище Канал шейки матки
Норма лейкоцитов в мазке на флору до 5 До 10 До 30
Эпителий 5-10 5-10 5-10
Количество слизи в мазке на флору Отсутствует Умеренное Умеренное
Эритроциты
Гонококки
Трихомонады
Мицелий грибов
Ключевые клетки
Палочки Додерлейна 10⁷ кое/мл

Эритроциты могут обнаруживаться, если женщина сдавала мазок на флору во время менструации.

Мазок на флору при беременности

Мазок на флору женщина должна сдавать при
подготовке к беременности. Если обнаруживаются отклонения, заранее проводится
лечение. Мазок при беременности сдается трижды — при постановке на учет, во
втором и третьем триместре. В случае плохого мазка при беременности проводится
лечение, назначают контрольные анализы. Подготовиться к исследованию беременной
нужно так же, как и остальным пациенткам.

Расшифровка результатов у беременной немного
отличается. Допускается содержание лейкоцитов и эпителия до 20, повышенное
количество слизи. Это естественные изменения функции влагалища, связанные с
беременностью.

Что врач не видит при микроскопии мазка на флору

Мазок направлен только на определение микрофлоры влагалища. Анализ не выявляет:

  • онкологические заболевания — для
    это проводится цитологическое исследование;
  • беременность — изменения слизистой
    неспецифичны для беременности, для выявления этого факта проводят тест на ХГЧ;
  • вирусные заболевания — вирусы
    настолько малы, что под микроскопом их не видно, к тому же они расположены
    внутриклеточно.

Однако если в общем мазке выявлены изменения,
гинеколог назначает дополнительное обследование. Вирусные инфекции
диагностируют по анализу крови — определение антител или генетического
материала вирусов.

Степени чистоты влагалища

По анализу мазка на флору определяют степень
чистоты влагалища. Это наличие или отсутствие патогенных микроорганизмов,
содержание нормальной микрофлоры.

  • 1 степень — допустимое содержание
    слизи, эпителия и лейкоцитов, преобладание лактобактерий, отсутствие
    полиморфной микрофлоры. Соответствует женскому здоровью.
  • 2 степень — содержание эпителия и
    лейкоцитов на границе нормы, немного кокковой микрофлоры. Нормальный вариант,
    встречается наиболее часто.
  • 3 степень — повышены лейкоциты,
    эпителий. Снижено содержание лактобактерии, наблюдается рост грибов и кокков.
    Свидетельствует об активном воспалении.
  • 4 степень — много лейкоцитов,
    эпителия. Резко снижено содержание хороших лактобактерий, обильное
    распространение кокковой и грибковой микрофлоры.

Патогенные бактерии выносят отдельной строкой.
Если они обнаружены, сразу выставляется 4 степень чистоты влагалища, вне
зависимости от уровня лейкоцитов, эпителия, слизи.

Мазок на флору женщины сдают при ежегодном
гинекологическом обследовании, прохождении медосмотров для трудоустройства, при
наличии жалоб на здоровье. Перед сдачей анализа нужно правильно готовиться —
отменить все используемые лекарственные препараты, половые контакты за три дня
до посещения гинеколога. Нежелательно сдавать мазок на флору во время месячных.
Анализ показывает состояние нормальной микрофлоры, наличие патогенных
микроорганизмов.

Днк enterobacteriaceae норма в мазке у женщин — Сайт о здоровье

Источник: o-kak.ru

Читайте также

Enterobacterales Adeolu et al. 2016

Enterobacterales (лат.) — большой порядок бактерий, включающий в себя такие известные патогены как: сальмонеллы, кишечная палочка, чумная палочка и т. д. До 2016 года употреблялось название «Enterobacteriales», но этот таксон был описан с нарушением норм Международного кодекса номенклатуры прокариот [en] в орфографии и у него отсутствовал типовой род, поэтому это название было заменено. При описании порядка изменили его классификацию, разделив семейство энтеробактерий (Enterobacteriaceae), единственное в порядке «Enterobacteriales», на 8 самостоятельных семейств.

Содержание статьи:

Содержание

Описание [ править | править код ]

Представители порядка — палочки длиной 1—5 мкм. Они грамотрицательны, факультативные анаэробы и ферментируют углеводы с образованием муравьиной кислоты и других конечных продуктов (так называемое формиатное брожение). Некоторые из них могут разлагать лактозу. Большинство имеет жгутики для передвижения. Не образуют спор.

Множество представителей порядка являются частью нормальной микрофлоры кишечника и могут быть найдены в кишечнике человека и других животных, тогда как остальные обитают в почве, воде или паразитируют на различных растениях и животных. Лучше всего изучена кишечная палочка — важнейший модельный организм, использующийся в генетике, молекулярной биологии из-за высокой изученности её генетики и биохимии.

Классификация [ править | править код ]

На июнь 2019 года в порядок включают следующие семейства и роды [1] :

  • Семейство Budviciaceae Adeolu et al. 2016
  • Budvicia Bouvet et al. 1985 emend. Lang et al. 2013
  • Leminorella Hickman-Brenner et al. 1985
  • Pragia Aldová et al. 1988
  • Семейство Enterobacteriaceae Rahn 1937 — Энтеробактерии[2]
  • Biostraticola Verbarg et al. 2008
  • Buttiauxella Ferragut et al. 1982
  • Cedecea Grimont et al. 1981
  • Citrobacter Werkman and Gillen 1932 — Цитробактеры[3]
  • Cronobacter Iversen et al. 2008 emend. Brady et al. 2013
  • Enterobacillus Patil et al. 2015
  • Enterobacter Hormaeche and Edwards 1960 emend. Brady et al. 2013 — Энтеробактеры[4]
  • Escherichia Castellani and Chalmers 1919 — Эшерихии[5]
  • Franconibacter Stephan et al. 2014
  • Gibbsiella Brady et al. 2011 emend. Kim et al. 2013
  • Izhakiella Aizenberg-Gershtein et al. 2016
  • Klebsiella Trevisan 1885 emend. Drancourt et al. 2001 — Клебсиеллы
  • Kluyvera Farmer et al. 1981 — Клюйверы[4]
  • Leclercia Tamura et al. 1987
  • Mangrovibacter Rameshkumar et al. 2010
  • Metakosakonia Alnajar and Gupta 2017
  • Plesiomonas corrig. Habs and Schubert 1962
  • Pseudescherichia Alnajar and Gupta 2017
  • Raoultella Drancourt et al. 2001
  • Saccharobacter Yaping et al. 1990
  • Salmonella Lignieres 1900 — Сальмонеллы
  • Shigella Castellani and Chalmers 1919 — Шигеллы
  • Shimwellia Priest and Barker 2010
  • Thorsellia Kämpfer et al. 2006
  • Trabulsiella McWhorter et al. 1992
  • Yokenella Kosako et al. 1985
  • Семейство Erwiniaceae Adeolu et al. 2016
  • Buchnera Munson et al. 1991
  • Erwinia Winslow et al. 1920 emend. Hauben et al. 1998 — Эрвинии
  • Mixta Palmer et al. 2018
  • Pantoea Gavini et al. 1989 emend. Brady et al. 2010
  • Phaseolibacter Halpern et al. 2013
  • Tatumella Hollis et al. 1982 emend. Brady et al. 2010
  • Wigglesworthia Aksoy 1995
  • Семейство Hafniaceae Adeolu et al. 2016
  • Edwardsiella Ewing and McWhorter 1965 — Эдвардсиеллы[4]
  • Hafnia Møller 1954 — Гафнии
  • Obesumbacterium Shimwell 1963
  • Семейство Morganellaceae Adeolu et al. 2016
  • Arsenophonus Gherna et al. 1991
  • Cosenzaea Giammanco et al. 2011
  • Moellerella Hickman-Brenner et al. 1984
  • Morganella Fulton 1943 — Морганеллы[6]
  • Photorhabdus Boemare et al. 1993
  • Proteus Hauser 1885 — Протеи[3]
  • Providencia Ewing 1962 — Провиденции[7]
  • Xenorhabdus Thomas and Poinar 1979 emend. Thomas and Poinar 1983
  • Семейство Pectobacteriaceae Adeolu et al. 2016
  • Brenneria Hauben et al. 1999 emend. Brady et al. 2015
  • Dickeya Samson et al. 2005
  • Lonsdalea Brady et al. 2012
  • Pectobacterium Waldee 1945 emend. Hauben et al. 1998
  • Sodalis Dale and Maudlin 1999
  • Семейство Thorselliaceae Kämpfer et al. 2015
  • Coetzeea Kämpfer et al. 2016
  • Семейство Yersiniaceae Adeolu et al. 2016
  • Chania Ee et al. 2016
  • Ewingella Grimont et al. 1984
  • Rahnella Izard et al. 1981
  • Rouxiella Le Flèche-Matéos et al. 2015
  • Samsonia Sutra et al. 2001
  • Serratia Bizio 1823 — Серрации[7]
  • Yersinia van Loghem 1944 — Иерсинии
  • Роды incertae sedis
  • Phytobacter Zhang et al. 2017
  • Род Calymmatobacterium Aragão and Vianna 1913 (Калимматобактерии [8] ) систематики сводят в синонимы к роду Klebsiella [9] , род Levinea Young et al. 1971 — к роду Citrobacter [10] .

    Энтеробактерии — большая группа микроорганизмов, обитающих в различных отделах ЖКТ и оказывающих позитивное или патогенное воздействие на организм человека. Все энтеробактерии подразделяются на три группы: патогенные, условно-патогенные и сапрофитные.

    • Большинство энтеробактерий являются представителями микробного биоценоза кишечника. Это клебсиелла, энтеробактер, серрация, протей, цитробактер, провиденция и иерсиния. Они выполняют в макроорганизме жизненно важные функции, но под воздействием негативных факторов становятся опасными и вызывают различные заболевания.
    • К абсолютным патогенам относятся шигеллы, сальмонеллы и некоторые виды эшерихий. Эти микробы, попав в организм человека извне, вызывают острые кишечные инфекции и прочие патологии, угрожающие жизни больного.
    • Сапрофитные энтеробактерии не опасны в эпидемиологическом отношении и не имеют значения для практической медицины.

    Днк enterobacteriaceae что это такое 2

    возбудители кишечных инфекций

    В семейство Enterobacteriaceae входит множество родов и видов, способных вызвать развитие серьезных заболеваний у человека. Одним из основных представителей данного семейства является энтеробактер. Он считается нормальным обитателем кишечника человека, обеспечивающим его адекватное функционирование. Проникая в другие органы, этот микроб становится причиной серьезных недугов. Чаще всего поражаются почки, мочевыводящие пути, органы репродуктивной и дыхательной систем. Enterobacter spp – одна из ведущих причин смерти новорожденных детей.

    Этиология

    Энтеробактерии — аспорогенные палочковидные бактерии, способные развиваться и размножаться как в присутствии кислорода, так и без него. Микробы имеют жгутики, обеспечивающие их подвижность, а некоторые образуют капсулу. По Граму они окрашиваются в красный цвет. Большинство бактерий ферментируют углеводы до кислоты и газа, являются оксидазоотрицательными и каталазоположительными, а также способными к денитрификации.

    Энтеробактерии получают энергию из химических соединений. В качестве источника углерода они используют органические вещества. Бактерии растут на универсальных питательных средах, обязательным компонентом которых является лактоза. Они формируют характерные колонии: на Эндо – красные блестящие слизистые или мелкие бледно-розовые без отпечатка на среде, на Плоскирева – кирпично-красные, цвета среды или желтоватые колонии. При выращивании в бульоне Хоттингера бактерия вызывает равномерное помутнение с выпадением осадка. Температурный оптимум для них — 35-36 градусов.

    Факторы патогенности бактерий:

    1. Ферменты,
    2. Эндотоксин,
    3. Белки-адгезины,
    4. Энтеротоксин,Ммикроворсинки.

    Энтеробактерии отличаются высокой выживаемостью. Они устойчивы к большинству антисептиков, дезинфектантов и противомикробных средств.

    Днк enterobacteriaceae что это такое 2Потенциально-патогенные энтеробактерии — постоянные «жители» человеческого организма, обитающие на эпителии кишечника в строго определенном количестве, которое не должно превышать 104 КОЕ/г. Под воздействием эндогенных или экзогенных факторов микробы начинают активно размножаться, утрачивают свои полезные качества и приобретают болезнетворные свойства. В организме формируется кишечный дисбиоз. При этом оппортунистические микробы начинают покидать пределы кишечника и, попадая в другие биоценозы, вызывать развитие различных недугов. Нередко инфекционная патология затрагивает органы мочевыделения, гепатобилиарной зоны, нервной системы. Со временем появляется доминирующий вид бактерий, который угнетает рост других. Он и становится непосредственной причиной патологии.

    Патогенные бактерии — обитатели объектов внешней среды: водоемов, почвы, флоры и фауны. Широкое распространение микробов в природе не позволяет человеку полностью обезопасить себя.

    Enterobacter cloacae при нормальных условиях не приносят вреда человеку. Они мирно сосуществуют с макроорганизмом без ущерба для здоровья. Бактерии обычно поражают больных в лечебных учреждениях, получающих длительную антибиотикотерапию. Они не опасны для здорового организма. Вместе с клебсиеллой, цитробактером, протеем и стафилококком энтеробактеры заселяют пищеварительный тракт. Большинство микробов из рода Enterobacter непатогенны для человека. Бактерии приобретают болезнетворные свойства при резком снижении иммунной защиты.

    Резервуаром инфекции является больной человек или животное, в организме которого персистирует микроб. Вместе с калом больных энтеробактер попадает в окружающую среду. При этом фекалии становятся источником заражения. Входными воротами инфекции является ЖКТ. Распространение энтеробактерий происходит фекально-оральным или контактно-бытовым механизмами, которые реализуются алиментарным, водным, контактным, артифициальным и даже половым путями.

    Патогенез

    Заболевания, обусловленные энтеробактериями, чаще всего развиваются у лиц с иммунодефицитом.

    Группу риска по энтеробактериальной инфекции составляют:

    1. Новорожденные,
    2. Пожилые люди,
    3. Часто болеющие лица,
    4. Больные хроническими патологиями ЖКТ,
    5. Пациенты, длительно находящиеся на стационарном лечении.

    Кишечные микробы вызывают не только заболевания органов пищеварения, но и близлежащих структур. Воспаление может развиться практически в любой части тела человека: от зева до ануса.

    Патологии, которые вызывают энтеробактерии:

    • Дисбактериоз, дизентерия, сальмонеллез, эшерихиоз.
    • Воспаление мочевыводящих путей и органов.
    • Пневмония.
    • Менингит, абсцедирование мозговой ткани и прочие ликворные нарушения.
    • Инфекция органов женской репродуктивной системы.
    • Воспаление органов гепатобилиарной зоны.
    • Гематогенные расстройства — бактериемия, сепсис.

    Энтеробактерии являются возбудителями внутрибольничных инфекций. Микробы проникают в кровяное русло при проведении инвазивных манипуляций, катетеризации мочевого пузыря или внутривенного введения нестерильных лекарств. В обширных очагах довольно сложно снизить активность бактерий.

    В результате взаимодействия возбудителя и соответствующих структур макроорганизма развивается инфекционный процесс, который состоит из адгезии, инвазии, колонизации, токсинообразования.

    Энтеробактер обладает тропизмом к эпителиоцитам кишечника. Адгезия осуществляется за счет приближения микроба, а также взаимодействия его ворсинок с рецепторами эпителия. Бактерии проникают внутрь клетки и начинают активно размножаться. Процессы колонизации и токсинообразования определяют выраженность и разнообразие клинических проявлений инфекции.

    Симптоматика

    Энтеробактериозы обычно протекают без каких-либо особенностей в симптоматике. Клинические признаки заболеваний определяются локализацией очага поражения и видом возбудителя.

    Днк enterobacteriaceae что это такое 3

    Общие проявления патологии:

    1. Боль в очаге поражения различной интенсивности, длительности, распространенности.
    2. Общее недомогание, слабость, вялость, разбитость, снижение работоспособности.
    3. Признаки воспаления на гемограмме – лейкоцитоз и подъем СОЭ.
    4. Лихорадка, озноб, миалгия, артралгия, бледность кожи, снижение аппетита, нарушение сознания.
    5. Диспепсия — тошнота, рвота, изжога, метеоризм.
    6. Нарушение стула — изменение консистенции, появление патологических примесей.

    Enterobacter aerogenes является возбудителем менингита, который нередко осложняется абсцедированием вещества мозга. У больных возникает интоксикация, очаговые неврологические симптомы, менингеальные знаки. При поражении мочевыводящих путей у больных появляется дизурия, боль в конце акта мочеиспускания. Воспаление желчного пузыря и протоков проявляется болью и спазмами в правом подреберье. Воспалительный процесс в легочной ткани развивается у каждого четвертого носителя. У больных на фоне выраженной интоксикации возникает кашель с гнойной мокротой. При отсутствии соответствующей терапии формируются тяжелые осложнения – коллапс и шок.

    Диагностика

    Диагностика энтеробактериальной инфекции заключается в проведении лабораторных исследований. Специалисты выслушивают жалобы больных, собирают анамнез жизни и болезни, проводят общий осмотр.

    Днк enterobacteriaceae что это такое 3

    • В гемограмме — лейкоцитоз, сдвиг формулы влево, подъем СОЭ.
    • Бакпосев мочи проводится с целью выделения возбудителя патологии органов мочевыделения. Бактериурия — содержание в 1 мл мочи более 105 микробных тел энтеробактерий. Когда этот признак сочетается с выраженной и характерной симптоматикой, требуется незамедлительное лечение в стационаре.
    • Исследование кала проводят с целью определения причины кишечной дисфункции. Для выявления патогенных бактерий у больных берут мазок из прямой кишки и делают посев на среды, содержащие специальные красители и углеводы. Для этого используют простые пластинчатые среды Эндо, Плоскирева, висмут-сульфитный агар, а также среды накопления — селенитовый бульон или магниевую среду. После суточной инкубации изучают характер роста и проводят дальнейшую идентификацию путем изучения биохимических свойств на средах цветного ряда. В окрашенных по Граму мазках обнаруживают красные короткие палочки, образующие цепочки или располагающиеся хаотично. Enterobacter cloacae на твердых питательных средах образует слизистые лактозонегативные колонии. Подтверждают предполагаемый диагноз с помощью реакции агглютинации на стекле. После обнаружения возбудителя патологии проводят тест на чувствительность к антибиотикам и фагам.
    • Микробиологический анализ кала на условно-патогенные энтеробактерии проводится количественным методом. Для этого нативный кал пациента суспендируют в физрастворе и готовят ряд его десятикратных разведений. Затем производят высев из каждого разведения на селективные среды. Для энтеробактера используют чашечную среду Симмонса. После инкубации изучают рост культуры, подсчитывают количество характерных колоний и готовят препарат для микроскопии. Расчет производят по специальным формулам. В норме общее число энтеробактерий не должно превышать 104 КОЕ в 1 грамме фекалий.Увеличение этого количества является признаком кишечного дисбиоза.
    • Постановку диагноза при пневмонии, вызванной энтеробактериями, облегчает микробиологическое исследование мокроты на микрофлору.
    • При бактериемии выделяют возбудителя по гемокультуре или проводят анализ крови на стерильность.
    • Энтеробактерии в мазке у женщин можно обнаружить во время микробиологического исследования отделяемого влагалища или цервикального канала на микрофлору. Если наблюдается сплошной рост на чашках или количество характерных колоний превышает 100, делают вывод об этиологической роли энтеробактерий.
    • Вспомогательные методы – УЗИ желчного пузыря, поджелудочной железы, почек и эндоскопическое исследование желудка и кишечника.

    Методы лечения

    Лечение энтеробактериальной инфекции этиотропное, антибактериальное. Его назначают после определения локализации поражения. На начальных стадиях заболевания, когда этиология не выяснена, проводят эмпирическую терапию. Врачи назначают лекарства на основе видимых симптомов, руководствуясь собственным опытом. При доброкачественном течении заболевания подобное лечение позволяет устранить все симптомы в течение 6-12 дней. Во всех остальных случаях показано лечение антибиотиками. Больные из группы риска лечатся исключительно антибактериальными препаратами после полной идентификации патогенного организма.

    Днк enterobacteriaceae что это такое 3Обычно применяют антибиотики широкого спектра из группы пенициллинов «Амоксиклав», «Аугментин», цефалоспоринов «Цефтриаксон», «Цефазолин», аминогликозидов «Кларитромицин», «Азитромицин», фторхинолонов «Ципрофлоксацин», «Офлоксацин». У разных штаммов бактерий чувствительность к этим препаратам может существенно отличаться. Специалисты часто комбинируют антибактериальные средства и назначают препараты, усиливающие действие антибиотиков и стимулирующие иммунную систему организма.

    Дополнительно назначают пре- и пробиотики – «Линекс», «Хилак форте», «Бифиформ», а также иммуномодуляторы «Исмиген», «Полиоксидоний».

    Симптоматическая терапия проводится по принципам лечения острых кишечных инфекций. Больным назначают спазмолитики «Но-шпу», «Спазмалгон», обволакивающие средства «Смекту», противорвотные препараты «Мотилиум», «Церукал», энтеросорбенты «Полисорб», «Пипольфен», ферменты — «Креон-Д», «Мезим», «Панзинорм», лекарства от вздутия – «Эспумизан», «Редугаз», витаминные комплексы.

    Чтобы лечение было максимально эффективным и дало результаты в кратчайшие сроки, необходимо соблюдать щадящую диету. Диетотерапия заключается в исключении из рациона алкоголя, жирных, жареных, острых, соленных, пряных блюд, кондитерских изделий, хлебобулочной продукции, овощей и фруктов, содержащих много клетчатки и усиливающих процессы газообразования в кишечнике. Рекомендованы кисломолочные продукты, легкоусвояемые блюда и перетертые пюре, не раздражающие слизистую ЖКТ. Готовить следует на пару. Больным показано дробное питание небольшими порциями через каждые 2-3 часа. Строгий рацион — необходимое условия в период лечения и восстановления. Соблюдение принципов правильного лечебного питания позволит организму реабилитироваться после болезни за 2-3 дня.

    Рвота и понос — причина потери организмом жидкости и минеральных веществ. Чтобы быстрее избавиться от токсинов, необходимо больным обеспечить правильный питьевой режим. При этом пить желательно не просто воду, а растворы, восстанавливающие минеральный баланс.

    Своевременное и адекватное лечение делает прогноз заболевания благоприятным. Проблемы со стулом и общим самочувствием могут длительно сохраняться у пожилых людей, маленьких детей и лиц с ослабленным иммунитетом.

    Профилактические мероприятия

    Профилактические мероприятия, предупреждающие развитие заболеваний, вызванных энтеробактериями:

    1. Укрепление иммунитета,
    2. Соблюдение гигиенических норм и правил,
    3. Употребление в пищу качественных продуктов питания, чистых овощей и фруктов, термически обработанных мясных изделий,
    4. Исключение контактов с больными ОКИ,
    5. Проведение в домашних условиях влажной уборки с периодическим мытьем индивидуальных бытовых предметов,
    6. Содержание в чистоте жилища и прилегающей территории,
    7. Поддержание иммунитета на оптимальном уровне — закаливание, правильное питание, физическая активность, отсутствие стрессов, борьба с вредными привычками.

    При появлении признаков кишечного расстройства и дискомфорта в животе показан профилактический прием пре- и пробиотиков, витаминов и минеральных веществ.

    Видео: кишечные инфекции – лекция 1

    Видео: кишечные инфекции – лекция 2

    Днк enterobacteriaceae что это такое 4

    Энтеробактерии (лат. enterobacteriaceae) — семейство грамотрицательных (как и другие протеобактерии) палочкообразные (бациллы), споронеобразующие бактерии, длиной 1-5 мкм, со жгутиками для передвижения. Эти бактерии — факультативные анаэробы, расщепляют углеводы с образованием муравьиной кислоты и других конечных продуктов формиатного брожения. Некоторые из них могут разлагать лактозу.

    Множество представителей семейства являются частью микрофлоры кишечника человека и животных. Они представляют большое число нормальной микрофлоры человеческого организма и значительное количество патогенных микробов: сальмонелла, кишечная палочка, чумная палочка и др. Энтеробактерии определяют в различных отделах желудочно-кишечного тракта здорового человека: в тощей кишке – от 0 до 103 КОЕ/мл, в подвздошной — от 10 2 до 10 6 КОЕ/мл. В норме в составе факультативной микрофлоры кишечника они не должны превышать количество 10 4 КОЕ/г.

    Другая часть этих бактерий обнаруживается в воде и почве или паразитирует на различных растениях и животных. Хорошо изучена кишечная палочка — модельный организм, используемый в молекулярной биологии и генетике, в связи с изученностью её генетики и биохимии.

    Энтеробактерии в воде и почве месяцами остаются жизнеспособными, но за несколько минут гибнут от дезинфектантов и при очень высоких температурах через 1 час.

    Эти бактерии вырабатывают сахаролитические, протеолитические и др. ферменты, определение которых имеет таксонометрическое значение. Образуют индол, а глюкозу, лактозу, маннит ферментируют до кислоты и газа.

    Факторами патогенности являются:

    • эндотоксин, который освобождается после разрушения микробных клеток и адгезины,
    • цитотоксин,
    • экзотоксин.

    Бактерии могут проникать в макрофаги и размножаться в них. Патологический процесс усугубляется на фоне снижения активности фагоцитоза, падения барьерной функции тканей. Снижение в кишечнике полезной нормофлоры и нарушение колонизационной и защитной функции может приводить к проникновению в лимфу и кровь. Коли-бактериозы возникают при снижении количества полезной микрофлоры кишечника и иммунитета. После перенесённого заболевания невосприимчивость не формируется.

    Какие заболевания вызывают энтеробактерии?

    Группа энтеробактерий включающая: сальмонеллы, шигеллы, эшерихии, клебсиеллы, собственно энтеробактер, серрации, протей, морганеллы, провиденции и иерсинии в норме обитают в желудочно-кишечном тракте человека, но при снижении защитных свойств слизистой кишечника, могут вызывать инфекции желудочно-кишечного тракта или других органов.

    Энтеробактерии — представители родов citrobacier, ewardsiella, enterobacter, escherichia, hafnia, klebsiella, proteus, providencia, salmonella, serratia, yersinia вызывают инфекции мочеполовой системы (в том числе циститы, пиелонефриты, цервициты и т.п.). До 80% бактерий, обнаруживаемых в моче — энтеробактерии.

    Энтеробактерии становятся причиной различных заболеваний человека. Условно – патогенные бактерии вызывают гнойно-воспалительные процессы различной локализации: как эндогенные процессы — развиваются инфекции мочевыводящих путей (уретрит, цистит, пиелонефрит), половой системы (вагинит, трихомиоз, цервицит), дыхательных путей (пневмония), желудочно-кишечного тракта (холециститы, сальмонеллез, дизентерия, чума) и другие, так называемые коли-бактериозы, а как экзогенные – нагноение ран. Разные формы ОКЗ – острых кишечных заболеваний обусловлены патогенным действием различных энтеробактерий и чем агрессивнее токсины бактерий, тем тяжелее состояние, особенно у маленьких детей.

    Escherichia coli – кишечная палочка в норме определяется в желудочно-кишечном тракте и синтезирует секреторные иммуноглобулины и колицины. Они тормозят рост некоторых патогенных энтеробактерий и препятствуют проникновению их в слизистую оболочку стенки кишечника. E. сoli участвует синтезе витамина К (свертываемость). Некоторые патогенные штаммы кишечной палочки могут поражать слизистую кишечника, что проявляется кровавым водянистым поносом или диареей путешественников.

    У детей диарея, вызываемая патогенной энтерогеморрагической кишечной палочкой, может осложняться гемолитико-уремическим синдромом и почечной недостаточностью. Эта бактерия может поражать кровь, желчный пузырь, легкие, мочевыводящие пути и кожу. У новорожденных детей, особенно недоношенных, кишечная палочка может стать патогенным возбудителем бактериемии и менингита.

    Инфекции, обусловленные клебсиеллами (Klebsiella), энтеробактериями (Enterobacteriaceae) и серрациями (Serratia), обычно встречаются в больницах, чаще при снижении способности бороться против инфекций. Эти бактерии также часто поражают мочевыводящие, половые органы. Пневмония, вызванная клебсиеллами, наиболее распространена у больных сахарным диабетом и у злоупотребляющих алкоголем и имеет часто тяжелое течение.

    Симптоматика инфекций, вызываемых энтеробактериями.

    Симптомы инфекционного заболевания могут быть различны, в зависимости от места развития воспалительного процесса, однако все больные жалуются на общую слабость, повышение температуры, проявления интоксикации и боли в месте заболевшего органа. Для определения патогенных энтеробактерий обязательно нужно сдать анализы – кровь, мочу, мокроту, мазки или кал, в зависимости от локализации воспалительного процесса, пройти до обследование, для выявления функциональных нарушений.

    Важно соблюдать правила личной гигиены, следить за качеством, чистотой овощей-фруктов, питаться, учитывая индивидуальные особенности, избегать контакта с инфекционными больными и поддерживать свой иммунитет в норме.

    Как быстро восстановиться после инфекции?

    Восстановление и сохранение достаточного количества полезной нормофлоры кишечника – лакто- и бифидобактерий, способствует защите слизистой кишечника от проникновения патогенных бактерий и их токсинов в кровь и лимфу, выведению токсинов, созданию среды, в которой патогенные микроорганизмы не могут продолжать свою жизнедеятельность и выводятся из организма человека. Важно, что продукты жизнедеятельности полезных бактерий помогают иммунитету сохранять активность в борьбе с вредными бактериями.

    Синбиотический биокомплекс Нормофлорины – содержащий живые активные лакто- и бифидобактерии и их метаболиты с противовоспалительным, антисептическим, иммуногенным и питательным действием на слизистые за многие годы зарекомендовал себя, как активный помощник и борец против патогенных бактерий для малышей и взрослых, беременных и больных с различными заболеваниями. Достаточно быстро при употреблении Нормофлоринов снимается интоксикация и восстанавливается функция кишечника, общее самочувствие.

    Рекомендуется: как можно раньше начать принимать Нормофлорины в возрастных дозировках – Л – за 10-15 мин до еды утром (+ обед при запорах), Д – обед или вечер за 20 мин до еды, Б – на ночь или в микроклизме. Длительность приема 3-4 недели, до полного восстановления функции кишечника и улучшения общего самочувствия. Желательно 10-14 дней натощак принимать сорбенты – для выведения токсинов – зостерин или пекто, они уменьшают гнилостные, бродильные процессы, повышенное газообразование, улучшают работу кишечника.

    Важно закрепить эффект восстановления микрофлоры, улучшить работу поджелудочной железы, печени, кишечника, иммунитет – для этого хорошо далее в течение месяца использовать функциональное питание – Гармония жизни. В её составе также содержатся живые полезные лакто- и бифидобактерии, их метаболиты и пектин. Вкусно, полезно и эффективно!

    Днк enterobacteriaceae в мазке — Специалист по УЗИ

    Здравствуйте, доктор! Беспокоят выделения. В мазке большое количество лейкоцитов.
    Анализ на флороценоз такой:
    Bacteria 1*10в7степени
    Lactobacillus 3*10в6 степени
    Enterobacteriaceae 2*10в4степени.
    Больше ничего не обнаружено.
    Врач назначил мне и мужу антибиотики цифран, бифиформ, Флуконазол и свечи Полижинакс.
    Правильная ли это схема лечения?

    На сервисе СпросиВрача доступна консультация венеролога по любой волнующей Вас проблеме. Врачи-эксперты оказывают консультации круглосуточно и бесплатно. Задайте свой вопрос и получите ответ сразу же!

    Энтеробактерии (лат. enterobacteriaceae) — семейство грамотрицательных (как и другие протеобактерии) палочкообразные (бациллы), споронеобразующие бактерии, длиной 1-5 мкм, со жгутиками для передвижения. Эти бактерии — факультативные анаэробы, расщепляют углеводы с образованием муравьиной кислоты и других конечных продуктов формиатного брожения. Некоторые из них могут разлагать лактозу.

    Множество представителей семейства являются частью микрофлоры кишечника человека и животных. Они представляют большое число нормальной микрофлоры человеческого организма и значительное количество патогенных микробов: сальмонелла, кишечная палочка, чумная палочка и др. Энтеробактерии определяют в различных отделах желудочно-кишечного тракта здорового человека: в тощей кишке – от 0 до 103 КОЕ/мл, в подвздошной — от 10 2 до 10 6 КОЕ/мл. В норме в составе факультативной микрофлоры кишечника они не должны превышать количество 10 4 КОЕ/г.

    Другая часть этих бактерий обнаруживается в воде и почве или паразитирует на различных растениях и животных. Хорошо изучена кишечная палочка — модельный организм, используемый в молекулярной биологии и генетике, в связи с изученностью её генетики и биохимии.

    Энтеробактерии в воде и почве месяцами остаются жизнеспособными, но за несколько минут гибнут от дезинфектантов и при очень высоких температурах через 1 час.

    Эти бактерии вырабатывают сахаролитические, протеолитические и др. ферменты, определение которых имеет таксонометрическое значение. Образуют индол, а глюкозу, лактозу, маннит ферментируют до кислоты и газа.

    Факторами патогенности являются:

    • эндотоксин, который освобождается после разрушения микробных клеток и адгезины,
    • цитотоксин,
    • экзотоксин.

    Бактерии могут проникать в макрофаги и размножаться в них. Патологический процесс усугубляется на фоне снижения активности фагоцитоза, падения барьерной функции тканей. Снижение в кишечнике полезной нормофлоры и нарушение колонизационной и защитной функции может приводить к проникновению в лимфу и кровь. Коли-бактериозы возникают при снижении количества полезной микрофлоры кишечника и иммунитета. После перенесённого заболевания невосприимчивость не формируется.

    Какие заболевания вызывают энтеробактерии?

    Группа энтеробактерий включающая: сальмонеллы, шигеллы, эшерихии, клебсиеллы, собственно энтеробактер, серрации, протей, морганеллы, провиденции и иерсинии в норме обитают в желудочно-кишечном тракте человека, но при снижении защитных свойств слизистой кишечника, могут вызывать инфекции желудочно-кишечного тракта или других органов.

    Энтеробактерии — представители родов citrobacier, ewardsiella, enterobacter, escherichia, hafnia, klebsiella, proteus, providencia, salmonella, serratia, yersinia вызывают инфекции мочеполовой системы (в том числе циститы, пиелонефриты, цервициты и т.п.). До 80% бактерий, обнаруживаемых в моче — энтеробактерии.

    Энтеробактерии становятся причиной различных заболеваний человека. Условно – патогенные бактерии вызывают гнойно-воспалительные процессы различной локализации: как эндогенные процессы – развиваются инфекции мочевыводящих путей (уретрит, цистит, пиелонефрит), половой системы (вагинит, трихомиоз, цервицит), дыхательных путей (пневмония), желудочно-кишечного тракта (холециститы, сальмонеллез, дизентерия, чума) и другие, так называемые коли-бактериозы, а как экзогенные – нагноение ран. Разные формы ОКЗ – острых кишечных заболеваний обусловлены патогенным действием различных энтеробактерий и чем агрессивнее токсины бактерий, тем тяжелее состояние, особенно у маленьких детей.

    Escherichia coli – кишечная палочка в норме определяется в желудочно-кишечном тракте и синтезирует секреторные иммуноглобулины и колицины. Они тормозят рост некоторых патогенных энтеробактерий и препятствуют проникновению их в слизистую оболочку стенки кишечника. E. сoli участвует синтезе витамина К (свертываемость). Некоторые патогенные штаммы кишечной палочки могут поражать слизистую кишечника, что проявляется кровавым водянистым поносом или диареей путешественников.

    У детей диарея, вызываемая патогенной энтерогеморрагической кишечной палочкой, может осложняться гемолитико-уремическим синдромом и почечной недостаточностью. Эта бактерия может поражать кровь, желчный пузырь, легкие, мочевыводящие пути и кожу. У новорожденных детей, особенно недоношенных, кишечная палочка может стать патогенным возбудителем бактериемии и менингита.

    Инфекции, обусловленные клебсиеллами (Klebsiella), энтеробактериями (Enterobacteriaceae) и серрациями (Serratia), обычно встречаются в больницах, чаще при снижении способности бороться против инфекций. Эти бактерии также часто поражают мочевыводящие, половые органы. Пневмония, вызванная клебсиеллами, наиболее распространена у больных сахарным диабетом и у злоупотребляющих алкоголем и имеет часто тяжелое течение.

    Симптоматика инфекций, вызываемых энтеробактериями.

    Симптомы инфекционного заболевания могут быть различны, в зависимости от места развития воспалительного процесса, однако все больные жалуются на общую слабость, повышение температуры, проявления интоксикации и боли в месте заболевшего органа. Для определения патогенных энтеробактерий обязательно нужно сдать анализы – кровь, мочу, мокроту, мазки или кал, в зависимости от локализации воспалительного процесса, пройти до обследование, для выявления функциональных нарушений.

    Важно соблюдать правила личной гигиены, следить за качеством, чистотой овощей-фруктов, питаться, учитывая индивидуальные особенности, избегать контакта с инфекционными больными и поддерживать свой иммунитет в норме.

    Как быстро восстановиться после инфекции?

    Восстановление и сохранение достаточного количества полезной нормофлоры кишечника – лакто- и бифидобактерий, способствует защите слизистой кишечника от проникновения патогенных бактерий и их токсинов в кровь и лимфу, выведению токсинов, созданию среды, в которой патогенные микроорганизмы не могут продолжать свою жизнедеятельность и выводятся из организма человека. Важно, что продукты жизнедеятельности полезных бактерий помогают иммунитету сохранять активность в борьбе с вредными бактериями.

    Синбиотический биокомплекс Нормофлорины – содержащий живые активные лакто- и бифидобактерии и их метаболиты с противовоспалительным, антисептическим, иммуногенным и питательным действием на слизистые за многие годы зарекомендовал себя, как активный помощник и борец против патогенных бактерий для малышей и взрослых, беременных и больных с различными заболеваниями. Достаточно быстро при употреблении Нормофлоринов снимается интоксикация и восстанавливается функция кишечника, общее самочувствие.

    Рекомендуется: как можно раньше начать принимать Нормофлорины в возрастных дозировках – Л – за 10-15 мин до еды утром (+ обед при запорах), Д – обед или вечер за 20 мин до еды, Б – на ночь или в микроклизме. Длительность приема 3-4 недели, до полного восстановления функции кишечника и улучшения общего самочувствия. Желательно 10-14 дней натощак принимать сорбенты – для выведения токсинов – зостерин или пекто, они уменьшают гнилостные, бродильные процессы, повышенное газообразование, улучшают работу кишечника.

    Важно закрепить эффект восстановления микрофлоры, улучшить работу поджелудочной железы, печени, кишечника, иммунитет – для этого хорошо далее в течение месяца использовать функциональное питание – Гармония жизни. В её составе также содержатся живые полезные лакто- и бифидобактерии, их метаболиты и пектин. Вкусно, полезно и эффективно!

    Энтеробактеры представляют собой грамотрицательные бактерии, имеющие форму палочек, покрытых жгутиками. Они не образуют спор, развиваются в анаэробных условиях, но способны выживать в присутствии кислорода. Большинство данных микроорганизмов входят в состав нормальной кишечной микрофлоры человека и животных, а некоторые обитают в воде, почве и продуктах питания.

    Типичные представители энтеробактерий

    Бактерии рода Enterobacter относятся к семейству enterobacteriaceae и включают в себя 12 видов, относящихся преимущественно к условно патогенной флоре, населяющей кишечник человека. Наибольший интерес для медиков имеют энтеробактеры, которые при определенных условиях способны вызывать заболевания у людей.

    1. Enterobacter cloacae является представителем нормальной микрофлоры дистального отдела кишечника. Но после приема антибиотиков, при снижении иммунитета или развитии дисбактериоза, его усиленное размножение приводит к нарушению работы ЖКТ. Из-за непосредственной близости ануса к наружным половым органам у женщин может происходить инфицирование, приводящее к вагинитам, цервицитам и воспалениям других отделов мочеполовой системы. Развитие микроорганизмов в дыхательных путях приводит к тяжелой форме пневмонии, а вот проникновение их в кровяное русло вызывает септицемию.
    2. Enterobacter aerogenes чаще других микробов является причиной больничных инфекций. Особую опасность представляет инфицирование внутрисосудистых катетеров, шунтов и протезов, провоцирующее инфекционный эндокардит, тромбофлебит или общий сепсис.
    3. Enterobacter agglomerans, обозначенные в современной литературе термином Pantoea agglomerans, поражают преимущественно органы мочеполовой системы мужчин и женщин, а также респираторный тракт.
    4. Enterobacter sakazakii, отнесенный в последнее время к роду Cronobacter, представляет большую опасность для новорожденных детей, особенно, имеющих недостаточную массу тела, аномалии развития и врожденные заболевания иммунной системы. Доказано, что Энтеробактер саказаки вызывает инфекционное воспаление оболочек головного и спинного мозга, образование некротических очагов на стенках кишечника, явления сепсиса.
    5. Enterobacter gergoviae, переименованный в Pluralibacter gergoviae, вызывает кишечные расстройства, поражения органов выделения, дыхания и размножения.

    Другие условно патогенные бактерии рода энтеробактер, к которым относятся Enterobacter asburiae, Enterobacter hormaechei, Enterobacter ludwigii и Enterobacter kobei поражают преимущественно ЖКТ и респираторные органы.

    Иногда в результатах анализов встречается термин «лактозонегативные энтеробактерии», что указывает на наличие микроорганизмов, препятствующих правильному перевариванию продуктов и вызывающих изжогу, метеоризм, диарею, срыгивание и другие диспептические явления. В составе нормальной микрофлоры их количество не должно превышать 5%.

    Таксономическая принадлежность

    Группа: V грамотрицательные факультативные анаэробы

    Отдел: I грамотрицательные микроорганизмы

    Название рода было утверждено в 1963 году. Но проведенные в последующем исследования генома привели к существенным изменениям в систематике. В результате этого E.agglomerans выделили в отдельный род Pantoea, а E.sakazakii отнесли к роду Cronobacter.

    Поэтому современная классификация включает 12 видов бактерий рода энтеробактер, из которых наибольшее эпидемиологическое значение имеют энтеробактер клоака и аэрогенес.

    Строение, жизненный цикл и свойства микробов

    По внешнему строению энтеробактеры напоминают прямые палочки. Их тело полностью покрыто жгутиками, обеспечивающими движение. Единственным неподвижным видом является E.asburiae.

    Диаметр микроорганизмов колеблется от 0,6 до 1 мкм, а длина — от 1.2 до 3 мкм. При диагностическом исследовании в мазках обнаруживаются единичные или соединенные в короткие цепочки бактерии. Все представители кишечной группы рода энтеробактер быстро растут на стандартных и селективно-дифференциальных питательных средах.

    Бактерии принадлежат к группе факультативных анаэробов, не образуют спор, но у некоторых штаммов имеются капсулы. Местом их обитания являются слизистые оболочки кишечного тракта, органов мочеполовой системы и дыхания. При этом микроорганизмы способны выживать в экскрементах, почве, водоемах, на растениях, кожных покровах животных и других объектах внешней среды.

    Род энтеробактер становится заразен для людей в период снижения резистентности организма или после длительного курса антибиотикотерапии. В первую очередь ускоряется пролиферация Enterobacter cloacae в тонком кишечнике, что для данных бактерий не характерно, так как большинство их населяет толстый отдел.

    Энтеробактеры опасны для новорожденных младенцев с ослабленным иммунитетом в период прохождения через родовые пути. Инфицирование человека может произойти при попадании большого количества микроорганизмов с недоброкачественными продуктами питания или при заглатывании воды в открытых водоемах.

    Низкая чувствительность к антибиотикам у представителей энтеробактер приводит к тому, что они быстро замещают лакто- и бифидобактерии, количество которых резко снижается во время продолжительного применения человеком антибиотиков. Такой дисбактериоз приводит к возникновению заболеваний.

    Лабораторная диагностика: что означают цифры

    У взрослого человека в кишечнике содержание микроорганизмов рода энтеробактер, включающих в себя Enterobacter cloacae, aerogenes и другие виды, не должно превышать 10 4 колониеобразующих единиц на 1 г кала.

    Бактерии энтеробактер в кале ребенка появляется с первых дней жизни, но его количество и соотношение с другими микроорганизмами будет постоянно изменяться, так как в первые 3-4 месяца идет интенсивное заселение кишечника. Искусственное введение в организм малыша бифидо и лактобактерий позволяет поддерживать баланс микрофлоры кишечника.

    При выявлении у новорожденных детей пневмонии, возникает подозрение на инфицирование их во время прохождения родовых путей. В этом случае у матери в мазке из цервикального канала обнаруживается Enterobacter aerogenes с концентрацией более 10 5 КОЕ. Чтобы предотвратить такой путь заражения беременным проводят бакпосев на обнаружение Enterobacter aerogenes, Cronobacter sakazakii и некоторых других микроорганизмов, выявляемых при обычном бакпосеве.

    Инфицирование ребенка может произойти, если в грудном молоке матери высеян энтеробактер, концентрация которого превышает допустимые показатели. Однако диагноз подтверждается после возникновения характерных клинических признаков и обнаружении Enterobacter cloacae в кале у ребенка в количестве, превышающем 10 4 КОЕ.

    Анализ мочи проводится для выяснения причин возникновения урогенитальных инфекций и выявления скрытых воспалений почек и мочевого пузыря. Если при отсутствии клинических симптомов у женщин концентрация энтеробактер в 1 мл мочи превышает 10 5 КОЕ, то диагноз подтверждается, и назначается курс лечения. Если же количество в моче Enterobacter cloacae ниже данного показателя, то это свидетельствует о загрязнении лабораторного материала во время его забора.

    Если клиника заболевания имеет выраженный характер, то допустимый порог в 1 мл мочи составляет не более Enterobacter cloacae 10 в 4 степени.

    Делая посев из зева, следует знать, какая норма энтеробактер аэрогенес должна быть у человека, так как ее превышение может спровоцировать тяжелую форму пневмонии. Если показатель превышает Enterobacter aerogenes 10 2 КОЕ и сопровождается клиническими признаками, то следует начинать немедленное лечение.

    Пациенты, у которых выявлено наличие энтеробактера клоаке в горле, но не имеющие симптомов поражения респираторного тракта, считаются носителями. У них значительно повышается риск возникновения пневмонии при попадании в условия стационара, так как на ее долю приходится 10% случаев от совокупности внутрибольничных инфекций.

    Норма энтеробактер клоаке в зеве составляет от 10 2 до 10 4 КОЕ, но при этом их количество не должно значительно превышать концентрацию других форм нормальной микрофлоры.

    В чем опасность для человека

    Наибольшую опасность энтеробактеры представляют для новорожденных, так как вызывают:

    • менингит;
    • гнойное воспаление почек и мочевыводящих путей;
    • некротический колит;
    • тяжелые поражения кровеносной и лимфатической системы;
    • гнойничковые и язвенные поражения кожи у грудничков.

    Летальность при этом составляет от 55 до 80%.

    Респираторные заболевания, вызванные Enterobacter cloacae, которые локализуются в горле, проявляются повышением температуры тела, слабостью и продуктивным кашлем. Опасность данных инфекционных заболеваний заключается в том, что даже при грамотной своевременной терапии могут наблюдаться параличи, резкое падение кровяного давления, приводящее к потере сознания, асфиксия. Смертность составляет до 25%.

    Энтеробактеры являются возбудителями бактеремий, при которых происходит интенсивное размножение микроорганизмов в крови, приводя к развитию патологий во всех внутренних органах.

    У мужчин бактерии рода энтеробактер часто вызывают простатиты и уретриты. У женщин они становятся причиной воспалений органов мочеполовой системы, которые очень тяжело поддаются лечению.

    Наиболее восприимчивыми являются люди, перенесшие серьезные травмы, больные сахарным диабетом, а также другими болезнями, подавляющими синтез клеток иммунитета.

    Особенности лечения

    Так как представители рода Enterobacter spp. устойчивы ко многим антимикробным препаратам, то перед началом лечения необходимо установить чувствительность выделенного микроорганизма к конкретному антибиотику. Далее назначается комплексная терапия, позволяющая, как избавиться от представителей энтеробактер и устранить симптомы вызванного ими заболевания, так и повысить общую резистентность организма.

    С этой целью применяются аминогликозиды, Бета-лактамы, тетрациклины и цефалоспорины 3-го поколения. Наиболее широкое применение в борьбе с энтеробактер клоаке и аэрогенес нашел Метронидазол, Пиперациллин, Цефтриаксон, Ко-амоксиклав, Гентамицин.

    Инновацией в лечении заболеваний, вызванных энтеробактерами, является применение бактериофага Энтеробактер поливалентного очищенного. Ранее ученым не удавалось создать бактериофаг, какой бы объединял несколько фагов рода энтеробактер, включающих в себя Э. клоака, Э. аэрогенес и Э. аггломеранс, отделенных от метаболитов бактерий.

    Его эффективность доказана при следующих патологиях:

    • ЛОР-заболевания;
    • гастроэнтероколиты;
    • хирургические гнойные инфекции;
    • пневмонии;
    • дисбактериоз;
    • заболевания мочеполовой сферы у мужчин и женщин.

    Данный препарат может применяться детям с первых дней жизни.

    Другим проверенным средством против бактерий энтеробактер является бактериальный Секстафаг, воздействующий также на стафилококки, стрептококки, протеи, клебсиеллы и кишечную палочку.

    Прежде, чем лечить заболевания, вызванные Enterobacter aerogenes у беременной женщины, следует знать о возможных патологиях, развивающихся у плода при приеме следующих лекарственных средств:

    • нитрофураны: гемолитическая анемия;
    • сульфаниламиды: желтуха и гемолитическая анемия;
    • аминогликозиды: отрицательное влияние на слух и работу почек;
    • нитроксолин: атрофия зрительного нерва.

    Поэтому, выбирая, чем лечить инфекции, спровоцированные энтеробактер аэрогенес пациенткам в период вынашивания плода, медики отдают предпочтение пенициллинам и цефалоспоринам в сочетании с пробиотиками и щадящим рационом питания.

    Лечение болезней, вызванных возбудителями энтеробактер, средствами народной медицины сводится к усилению иммунитета, восстановлению баланса микрофлоры кишечника, а также дезинфекции ротовой полости и влагалища у женщин. С этой целью применяются травяные сборы, в состав которых входит ромашка, зверобой, кора дуба, полынь, шалфей и некоторые другие травы.

    Перед использованием любых народных методов необходимо проконсультироваться с врачом, так как самолечение может скрыть клинические симптомы заболевания, и инфекция перейдет в хроническую форму или вызовет осложнения.

    Работаю врачом ветеринарной медицины. Увлекаюсь бальными танцами, спортом и йогой. В приоритет ставлю личностное развитие и освоение духовных практик. Любимые темы: ветеринария, биология, строительство, ремонт, путешествия. Табу: юриспруденция, политика, IT-технологии и компьютерные игры.

    Фемофлор — 16 [реал-тайм ПЦР]

    Фемофлор 16 – расширенное молекулярно-биологическое исследование качественного и количественного состава микрофлоры мочеполовых путей у женщин, включающее оценку общей бактериальной массы, состояния нормофлоры, определение широкого спектра клинически значимых условно-патогенных микроорганизмов, в том числе микоплазм и уреаплазм, а также грибов рода Candida.

    Исследование информативно только для женщин репродуктивного возраста.

    Синонимы русские

    Исследование биоценоза влагалища методом ПЦР.

    Синонимы английские

    Femoflor 16 Real Time PCR.

    Метод исследования

    Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

    Какой биоматериал можно использовать для исследования?

    Соскоб урогенитальный.

    Как правильно подготовиться к исследованию?

    • Исследование (процедуру взятия урогенитального мазка) рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.

    Общая информация об исследовании

    По данным проекта Human Microbiom Project Национального института здоровья США, установлено, что в организме человека обитает около 10 000 видов микроорганизмов, преимущественными локусами распространения которых являются кожа, кишечник и урогенитальный тракт. Микрофлора мочеполовых путей у женщин в норме представлена преимущественно различными видами бактерий рода Lactobacillus, которые играют большую роль в предотвращении колонизации урогенитального тракта болезнетворными микроорганизмами. Вследствие различных причин может возникать дисбаланс микробиоты мочеполового тракта, выражающийся в нарушении её количественных и качественных характеристик, что в итоге приводит к развитию воспалительного процесса. Рядом исследований показано, что в этиологической структуре мочеполовых инфекций, обусловленных дисбалансом условно-патогенной флоры, в большинстве случаев играет роль ассоциация микроорганизмов и изменения в составе нормофлоры. Клинически такие состояния очень часто характеризуются нечеткой выраженностью симптомов, отсутствием специфических признаков и склонностью к хроническому течению, что обуславливает высокий риск присоединения инфекций, вызванных патогенными микроорганизмами, а также развития осложнений со стороны репродуктивной системы. Это определяет первостепенную роль своевременной и качественной диагностики урогенитальных инфекций, ассоциированных с условно-патогенной микрофлорой. Традиционные лабораторные исследования, проводимые для обнаружения болезнетворных микроорганизмов, которые позволяют определить факт наличия возбудителя, малоинформативны в диагностике заболеваний, вызванных условно-патогенной флорой, так как обнаружение её представителей само по себе не свидетельствует о заболевании. Также необходимо отметить, что условно-патогенная микрофлора, наиболее часто являющаяся причиной воспалительных заболеваний мочеполовых путей у женщин, представлена преимущественно анаэробными микроорганизмами (живущими в условиях отсутствия кислорода). Культивирование таких бактерий является технически очень сложным процессом, требующим специального оборудования, и в настоящее время в большинстве лечебных учреждений затруднено.

    Проблему качественной диагностики урогенитальных инфекций, вызванных условно-патогенной флорой, позволило решить внедрение в практику метода полимеразной цепной реакции с детекцией результатов в режиме реального времени. Методика исследования основана на обнаружении в исследуемом материале генетического материала (ДНК) микроорганизма, его многочисленном копировании и идентификации. Так как количество полученных в конце реакции копий зависит от исходного количества исследуемой ДНК, анализ позволяет определить содержание микроорганизма в биоматериале. Отечественная разработка Фемофлор, основанная на технологии RT-ПЦР, предназначена для исследования биоценоза урогенитального тракта у женщин и позволяет выявлять ДНК условно-патогенных микроорганизмов, ДНК лактобактерий и геномной ДНК человека (в качестве контрольного параметра). Спектр выявляемых показателей позволяет получить комплексное представление о качественных и количественных изменениях состава микрофлоры урогенитального тракта, что во многом определяет адекватную тактику медикаментозной терапии. Разработано несколько вариантов комплектации тестовых систем Фемофлор, в зависимости от спектра выявляемых условно-патогенных микроорганизмов. Фемофлор 16 позволяет определять 25 показателей, включая контроль взятия материала, общую бактериальную массу и 23 группы микроорганизмов:

    • Lactobacillus spp. – в большинстве случаев составляют основу нормальной микрофлоры влагалища у женщин репродуктивного возраста;

    • Семейство Enterobacteriaceae, Streptococcus spp., Staphylococcus spp. – являются компонентами нормальной флоры урогенитального тракта у женщин, могут быть причиной вагинита;

    • Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Porphyromonas spp. – представители нормальной и транзиторной (Gardnerella vaginalis) флоры, этиологические агенты развития бактериального вагиноза;

    • Eubacterium spp. – бактерии этого семейства преимущественно обитают в кишечнике, условно патогенны, могут вызывать развитие бактериального вагиноза;

    • Sneathia spp., Leptotrihia spp., Fusobacterium spp. – анаэробные микроорганизмы, с ними может быть ассоциировано развитие бактериального вагиноза;

    • Veilonella spp., Megasphaera spp., Dialister spp. – условно-патогенные анаэробные бактерии, участвуют в развитии бактериального вагиноза;

    • Lachnobacterium spp. – анаэробные труднокультивируемые бактерии, ассоциированы с развитием бактериального вагиноза;

    • Clostridium spp. – представитель нормальной флоры кишечника, в урогенитальном тракте условно-патогенный микроорганизм, может вызывать бактериальный вагиноз;

    • Mobiluncus spp., Corynebacterium spp. – анаэробные условно-патогенные микроорганизмы, могут вызывать инфекции урогенитального тракта;

    • Peptostreptococcus spp. – анаэробные кокки (шаровидные бактерии), условно-патогенны, могут вызывать бактериальный вагиноз;

    • Atopobium vaginae – анаэробный микроорганизм, может приводить к бактериальному вагинозу;

    • Mycoplasma hominis, Ureaplasma (urealyticum + parvum) – условные патогены;

    • Candida spp. – аэробные грибы, условно-патогенные микроорганизмы;

    • Mycoplasma genitalium – патогенный микроорганизм, вызывает уретрит (воспаление мочеиспускательного канала).

    Для чего используется исследование?

    • Для оценки качественного и количественного состава микрофлоры урогенитального тракта при наличии клинических проявлений воспаления, плановой подготовке к гинекологическим операциям, обследовании перед планированием беременности, в том числе при использовании вспомогательных репродуктивных технологий.

    Когда назначается исследование?

    • При наличии клинических или лабораторных признаков воспалительного процесса урогенитального тракта.

    • При планирующихся оперативных вмешательствах на органах малого таза с высоким риском развития инфекционных осложнений.

    • Диагностический поиск при наличии отягощенного акушерского анамнеза (невынашивание беременности, перинатальные потери, бесплодие).

    • Плановое обследование перед планированием беременности, при подготовке к процедуре экстракорпорального оплодотворения.

    • Мониторинг эффективности проводимой терапии, восстановления нормоценоза.

    Что означают результаты?

    КВМ – контроль взятия материала. Необходимым условием качественного ПЦР-исследования считается правильное взятие биоматериала. Показателем адекватности полученного образца является достаточное количество ДНК человека, которая в процессе реакции выделяется из клеток, выстилающих слизистую оболочку и попадающих в пробу при правильном взятии мазка. Показатель КВМ менее 104 свидетельствует о недостоверных результатах ПЦР, в таких случаях рекомендуется повторное взятие биоматериала.

    ОБМ (общая бактериальная масса) – общее количество бактерий, имеющихся в исследуемом образце. Снижение ОБМ ниже пороговых значений свидетельствует о недостаточном заселении данного локуса бактериями, в том числе вследствие антибиотикотерапии или гормональных нарушений.

    Нормальная флораLactobacillus spp. — их абсолютное количество в норме практически не отличается от показателя общей бактериальной массы, так как лактобактерии являются ее главной составляющей. Относительный показатель лактобактерий высчитывается автоматически путем вычисления разницы десятичных логарифмов между абсолютным значением лактобактерий и ОБМ (например, для абсолютного показателя ОБМ 107 десятичный логарифм будет равен 7). Снижение относительного показателя лактобактерий отражает дисбаланс урогенитальной микрофлоры.

    Оценка условно-патогенной флоры. Количество аэробных и анаэробных бактерий также оценивается в абсолютных и относительных показателях. Относительный показатель высчитывается по разнице между десятичными логарифмами микроорганизма или их группы и ОБМ. По уровню относительной величины определяется незначительное, умеренное и значительное повышение.

    Оценка микоплазм, уреаплазм и грибов рода Candida проводится только по абсолютному показателю, при превышении определенного порога (103 для Candida, 104 для микоуреаплазм) аппарат фиксирует положительный результат.

    Для более удобной интерпретации результатов исследования используется специальная цветовая маркировка:

    • контрольные показатели: белый – соответствие критериям, красный – несоответствие;

    • условно-патогенные микроорганизмы и дрожжеподобные грибы: белый – соответствие критериям нормы, желтый – умеренное отклонение, красный – выраженное отклонение от нормы;

    • нормальная флора (лактобациллы): зеленый – нормоценоз (соответствие критериям нормы), желтый – умеренный дисбиоз (умеренное отклонение от нормы), красный – выраженный дисбиоз;

    • патогенные микроорганизмы: белый – не обнаружены, красный – обнаружены.

    По результатам исследования автоматически дается характеристика состояния микрофлоры: нормоценоз, умеренный или выраженный дисбаланс, который по этиологической структуре может быть анаэробным, аэробным и смешанным.

    
    Скачать пример результата

    Важные замечания

    • Фемофлор 16 позволяет детально оценить состав микрофлоры, однако его желательно выполнять после исключения инфекций, вызванных патогенными микроорганизмами (Chlamydia trachomatis, Neisseria gohorrhoeae, Trichomonas vaginalis). Для уменьшения времени обследования возможно одновременное взятие биоматериала для обоих исследований.

    Также рекомендуется

    • Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов женщин (микрофлора), 3 локализации

    • Исследование микробиоценоза влагалища с определением чувствительности к антибиотикам

    • Chlamydia trachomatis, ДНК [реал-тайм ПЦР]

    • Neisseria gonorrhoeae, ДНК [реал-тайм ПЦР]

    • Trichomonas vaginalis, ДНК [реал-тайм ПЦР]

    • Посев на анаэробную флору

    • Планирование беременности — здоровье партнеров (для женщин)

    • Планирование беременности — здоровье партнеров (для мужчин)

    Кто назначает исследование?

    Гинеколог, репродуктолог, врач общей практики.

    Литература

    • Е. В. Рыбина. Современные методы оценки микробиоценоза влагалища. Журнал акушерства и женских болезней, том LXIV, выпуск 1/2015. С. 53-66.
    • Ю. С. Шишкова, Т. В. Становая, Л. Н. Бугрова, Е. Д. Графова, Т. А. Пономарева. Молекулярно-биологический анализ содержания лактобактерий во влагалище у женщин репродуктивного возраста. Вестник Челябинского государственного университета. 2013, №7 (298). С. 44-45.
    • Инструкция по применению набора реагентов для исследования биоценоза урогенитального тракта у женщин методом ПЦР в режиме реального времени Фемофлор. ООО «ДНК-Технология», 2017.
    • Е. Е. Баранова, Е. И. Батенева, И. С. Галкина, А. Е. Донников, В. В. Зорина, Л. В. Тумбинская, Г. Г. Шигорина. ПЦР в реальном времени: новые возможности технологии в решении репродуктивных проблем. Пособие для врачей. ООО «ДНК-Технология».

    Диагностика бактериального вагиноза, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

    Исследование, направленное на выявление генетического материала (ДНК) микроорганизмов Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, для диагностики бактериального вагиноза.

    Синонимы русские

    Бактериальный вагиноз, ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени], количественный анализ.

    Синонимы английские

    Bacterial vaginosis, DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR], quantitative, qRT-PCR.

    Метод исследования

    Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

    Единицы измерения

    ГЭ/мл (геномных эквивалентов на миллилитр).

    Какой биоматериал можно использовать для исследования?

    Соскоб урогенитальный.

    Общая информация об исследовании

    Бактериальный вагиноз является патологическим процессом, возникающим преимущественно у женщин репродуктивного возраста и характеризующимся изменением состава и соотношения микрофлоры влагалища. Он является частой причиной патологических выделений, может быть ассоциирован с развитием воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин и усиливает риск заражения инфекциями, передающимися половым путем. Развитие бактериального вагиноза также повышает риск развития патологий беременности: преждевременных родов, самопроизвольных абортов, низкого веса ребенка при рождении, развития послеродового эндометрита, вагинита. Следует отметить, что у 50 % женщин бактериальный вагиноз может иметь бессимптомное течение.

    У здоровых женщин репродуктивного возраста общее количество микроорганизмов в вагинальном отделяемом составляет 107-109 КОЕ/мл (колониеобразующих единиц на миллилитр) и состоит из более чем 40 разнообразных видов. Преобладают палочки Додерляйна, лактобациллы (Lactobacillus spp.): L. crispatus, L. jensenii, L. acidophilus, L. brevis. Они поддерживают постоянство биохимического состава и обладают защитной функцией. Лактобациллы обладают способностью перерабатывать гликоген в молочную кислоту, продуцировать пероксид водорода, что позволяет поддерживать постоянство рН влагалища, снижая кислотность. При этом подавляется рост условно-патогенной микрофлоры. При бактериальном вагинозе отмечается дисбиоз, нарушение соотношения и увеличение роста условно-патогенных, факультативно-анаэробных, анаэробных бактерий и микоплазм. К таким микроорганизмам относятся Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae, Prevotella spp., Mobiluncus spp., Ureaplasma spp. и ряд других. Снижение количества лактобактерий и избыточный рост условно-патогенных микроорганизмов приводит к нарушениям, которые могут клинически проявиться воспалением стенок влагалища – вагинитом, сопровождающимся выраженным зудом, жжением, аномальными выделениями.

    Наиболее часто при бактериальном вагинозе увеличивается количество микроорганизмов: Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae. Gardnerella vaginalis относится к условно-патогенной микрофлоре влагалища, является факультативным анаэробом. Микроорганизмы выявляются у 95-99 % женщин с бактериальным вагинозом, в том числе при его рецидивирующем течении. Чрезмерное размножение гарднерелл приводит к вытеснению преобладающих во влагалище при норме Lactobacillus spp. и стимулирует избыточный рост анаэробных бактерий и микоплазм. Риск развития гарднереллеза увеличивают вагинальные спринцевания, использование внутриматочных контрацептивов и спиралей, хламидийная или гонококковая инфекция и т.д. Бактерия Atopobium vaginae является грамположительной анаэробной палочкой, выявляющейся у 99-100 % пациентов с бактериальным вагинозом. Она играет роль в развитии воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин, часто обнаруживается при рецидивирующем бактериальном вагинозе. Обнаружение данных микроорганизмов играет важную роль в своевременной диагностике бактериального вагиноза, в том числе при его бессимптомном течении, предотвращении развития осложнений, а также в назначении правильной патогенетической терапии.

    Диагностика бактериального вагиноза основана на сочетании клинических проявлений и данных лабораторного обследования. В лабораторной диагностике является важным определение видового состава микрофлоры влагалища и определение соотношения микроорганизмов. При этом определяется количество бактерий Lactobacillus spp. и других микроорганизмов.

    К современным методам диагностики относится метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РТ-ПЦР). Это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал исследуемого возбудителя. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. При этом производится количественная оценка ДНК Bacteria (общее количество бактерий), Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae с анализом соотношения концентраций этих микроорганизмов. Метод применяется для диагностики бактериального вагиноза, в том числе при его бессимптомном течении, у женщин с патологиями беременности, с развитием воспалительных осложнений после беременности, а также при назначении и контроле проводимой терапии. При оценке результатов РТ-ПЦР выявляются фрагменты ДНК как живых, так и разрушенных микроорганизмов, поэтому результат исследования будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени, даже если лечение было подобрано правильно.

    Для чего используется исследование?

    • Для количественного выявления ДНК возбудителей Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae.
    • Для определения соотношения количества ДНК возбудителей Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae.
    • Для диагностики этиологии бактериального вагиноза и его осложнений.
    • Для назначения патогенетической терапии бактериального вагиноза и для оценки контроля проводимого лечения.

    Когда назначается исследование?

    • При клинических проявлениях бактериального вагиноза (патологические выделения из влагалища, зуд, жжение), а также при его бессимптомном течении.
    • При развитии осложнений бактериального вагиноза, патологии беременности: преждевременные роды, самопроизвольные аборты, низкий вес ребенка при рождении, развитие послеродового эндометрита, вагинита.
    • При назначении и контроле проводимой терапии бактериального вагиноза.

    Что означают результаты?

    Референсные значения

    ДНК Bacteria: более или равно 10^6 ГЭ/мл.

    ДНК Lactobacillus: не менее концентрации ДНК Bacteria.

    ДНК Gardnerellavaginalis: не превышает концентрацию ДНК Lactobacillus.

    ДНК Atopobiumvaginae: не превышает концентрацию ДНК Lactobacillus.

    Результаты выдаются с заключением врача.

    Причины повышения:

    • наличие ДНК микроорганизмов Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae;
    • бактериальный вагиноз, вызванный нарушением соотношения возбудителей Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae.

    Причины понижения:

    • отсутствие бактериального вагиноза, вызванного нарушением соотношения возбудителей Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae.

    
    Скачать пример результата

    Важные замечания

    • При оценке результатов РТ-ПЦР выявляются фрагменты ДНК как живых, так и разрушенных микроорганизмов, поэтому результат исследования будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени, даже если лечение было подобрано правильно.

    Также рекомендуется

    [09-007] Gardnerella vaginalis, ДНК [реал-тайм ПЦР]

    [09-116] Анализ микробиоценоза влагалища. 16 показателей, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

    [09-117] Анализ микробиоценоза влагалища. 8 показателей, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

    [10-048] Посев на Gardnerella vaginalis с определением титра и чувствительности к противомикробным препаратам

    [10-055] Исследование микробиоценоза влагалища с определением чувствительности к антибиотикам

    Кто назначает исследование?

    Гинеколог, акушер-гинеколог, уролог, терапевт, врач общей практики.

    Литература

    • Kusters JG, Reuland EA, Bouter S, Koenig P, Dorigo-Zetsma JW. A multiplex real-time PCR assay for routine diagnosis of bacterial vaginosis // Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2015 Sep;34(9):1779-85.
    • Oakley BB, Fiedler TL, Marrazzo JM, Fredricks DN. Diversity of human vaginal bacterial communities and associations with clinically defined bacterial vaginosis // Appl Environ Microbiol. 2008 Aug;74(15):4898-909.
    • Bradshaw CS, Tabrizi SN, Fairley CK, Morton AN, Rudland E, Garland SM. The association of Atopobium vaginae and Gardnerella vaginalis with bacterial vaginosis and recurrence after oral metronidazole therapy // J Infect Dis. 2006 Sep 15;194(6):828-36.

    норма в мазке, нормофлора, ДНК лактобациллус

    Lactobacillus spp у женщин – это грамположительные бактерии-анаэробы, необходимые для поддержания защитных функций. Их всегда находят во время исследования вагинального секрета. По количеству лактобацилл можно дать косвенную оценку состоянию организма. При снижении количества колоний требуется восстановительная терапия.

    Что такое нормофлора?

    В организме каждого человека постоянно присутствуют два вида бактерий:

    • полезные – обеспечивают работу органов, помогают организму справляться с заболеваниями, поддерживают естественные процессы;
    • условно-патогенные – не приносят вреда до тех пор, пока количество их колоний мало, но могут вызывать воспалительные процессы при размножении.

    Помимо этого, есть третий вид микроорганизмов, которые называются патогенными. Они не присутствуют в организме человека, но при определенных обстоятельствах могут проникать в него и вызывать инфекционно-воспалительные процессы.

    Нормофлора – это термин, обозначающий, что в организме человека бактерии присутствуют в правильной пропорции: лидируют полезные, не размножаются условно-патогенные и отсутствуют патогенные. Определить данное состояние можно с помощью лабораторной диагностики.

    Норма у женщин

    Особое внимание при изучении микрофлоры организма уделяют состоянию половых органов женщины. Их населяют различные бактерии, но лактобациллы представлены в подавляющем большинстве. Раньше специалисты при проведении анализа называли их общим термином «палочки Додерлейна». Со временем в гинекологии стали разделять полезные бактерии на виды, что позволило более точно определять причины нарушений и подбирать схему коррекции.

    В мазке здоровой женщины должно присутствовать не менее 10 миллионов колоний Lactobacillus spp в одном миллилитре вагинального секрета. У девочек, не ведущих половую жизнь, этот показатель доходит до 10*9 КОЕ/мл.

    lactobacillus spp у женщинlactobacillus spp у женщинLactobacillus spp у женщин: норма

    Основные функции

    Лактобактерии присутствуют в кишечнике на всем его протяжении. Они помогают переваривать и усваивать белки, жиры, углеводы, не дают размножаться условно-патогенной и патогенной флоре, нормализуют работу кишечника. Нормы для колоний полезных микроорганизмов устанавливаются индивидуально в зависимости от того, где они определяются. Например, в желудке находится не более 10*2 КОЕ на один миллилитр биологической жидкости. В кишечнике этот показатель увеличивается и достигает 10*6–10*7 КОЕ, что является нормой и для женских половых органов.

    Матка, главный детородный орган, регулярно подвергается атакам бактерий, вирусов и грибков, которые могут размножаться при несоблюдении личной гигиены (Candida) или передаваться при половом контакте (Chlamydia trachomatis). Лактобациллы подавляют рост патогенной микрофлоры и защищают влагалище от инфекции, предотвращая ее проникновение по цервикальному каналу в матку. Отсутствие защитных функций приводит к развитию воспаления наружных половых органов, которое впоследствии перейдет на шейку, эндометрий и придатки.

    Методы диагностики

    У женщин даже незначительные изменения количества лактобацилл отражается в мазке. Самостоятельно заподозрить дисбаланс микроорганизмов можно по таким симптомам:

    • усиление слизистых выделений;
    • изменение органолептических свойств вагинальной слизи – цвета и запаха;
    • появление зуда и жжения;
    • налет на наружных половых органах;
    • дискомфорт в малом тазу;
    • боль во время полового акта;
    • нарушения менструального цикла.

    Чтобы определить количество полезных бактерий, необходимо обратиться к гинекологу. Врач проведет мануальное обследование и возьмет вагинальный секрет для анализа. Результаты диагностики можно узнать в этот же день. Норма для выполнения анализа – до двух часов после забора материала.

    Если лабораторное исследование показывает, что количество палочек Додерлейна снижено, выполняется расширенный анализ. С его помощью определяются виды бактерий во взятом биологическом материале. Полимеразная-цепная реакция позволяет выделить из микроорганизма его ДНК. Лактобациллус определяется безошибочно, что обеспечивает высокую достоверность анализа.

    Методом ПЦР также можно установить присутствие условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, определив количество их колоний. Особое внимание уделяется Ureaplasma. По сей день мнения о необходимости лечения при повышении количества уреаплазмы расходятся.

    НормофлораНормофлораНормофлора

    Причины изменения нормальных показателей

    Уменьшение количества полезных бактерий говорит о нарушениях в работе организма. Что это такое и чем оно вызвано, разобраться самостоятельно бывает сложно. Узнать о причинах дисбаланса полезной и вредной микрофлоры можно при помощи комплексного обследования, основой которого является определение ДНК лактобациллуса и других микроорганизмов.

    Причиной снижения количества lactobacillus spp у женщины становятся следующие факторы:

    • смена гормонального фона – во второй фазе менструального цикла, при беременности, после родов, во время менопаузы и полового созревания;
    • несоблюдение личной гигиены — применение щелочного мыла, длительное ношение прокладок, пренебрежение чистотой нижнего белья;
    • самостоятельные спринцевания отварами трав или водой с целью очищения влагалища;
    • беспорядочные половые связи, контакты без барьерных контрацептивов;
    • паразитарные инфекции;
    • прием антибиотиков, глюкокортикостероидов;
    • неправильное питание, потребление большого количества простых углеводов и злоупотребление спиртными напитками.

    Исследования показывают, что женщины, регулярно употребляющие пиво, чаще страдают от молочницы – Vaginal Candidiasis.

    Лекарство для повышения количества лактобацилл в мазкеЛекарство для повышения количества лактобацилл в мазкеДля повышения количества лактобацилл в мазке нужна лекарственная терапия

    Как увеличить количество лактобактерий

    При снижении показателей Eubacterium в кишечнике и Lactobacillus во влагалище необходимо принимать меры для коррекции данного состояния. Схема лечения будет зависеть от того, что стало причиной нарушения нормальной микрофлоры. Если результаты анализа показали присутствие патогенных микроорганизмов, женщине назначается курсовой прием противомикробных и противопротозойных препаратов. Также рекомендуются вагинальные антисептики в форме свечей, тампонов и растворов, если нет противопоказаний для их использования. После завершения курса назначается индивидуальная схема для восстановления естественной микрофлоры.

    Если причиной нарушений стали экзогенные факторы – питание, вредные привычки, несоблюдение гигиены, – принимаются меры для их устранения. Восстановление микрофлоры влагалища предполагает:

    • применение вагинальных свечей, содержащих в составе живые колонии лактобактерий;
    • прием препаратов для нормализации кишечной микрофлоры;
    • употребление в пищу большого количества кисломолочных продуктов;
    • полноценное питание, предусматривающее ежедневное потребление овощей, фруктов, клетчатки и белка;
    • соблюдение интимной гигиены, использование специальных средств с молочной кислотой для подмывания.

    Периодическое нарушение микрофлоры влагалища и кишечника у женщин, сопровождающееся снижением колоний лактобацилл, возникает из-за подавленного иммунитета. Для предотвращения подобных нарушений необходимо укреплять защитные свойства организма. Регулярная профилактика позволяет постоянно поддерживать микрофлору в нормальном состоянии.

    Также рекомендуем почитать: поражение грибком Кандида альбиканс у женщин

    Роли метилирования и секвестрации в механизмах репликации ДНК у некоторых членов семейства Enterobacteriaceae

    1. Введение

    При делении растущих клеток им необходимо копировать свой генетический материал и распространять его, чтобы каждая дочерняя клетка получила одну копию . Это сложная задача, особенно если учесть огромную длину ДНК по сравнению с размером клетки. Во время репликации ДНК организация хромосом становится еще более сложной, поскольку репликационные вилки непрерывно производят новую ДНК.Эта ДНК содержит всю информацию, необходимую для построения клеток и тканей прокариотического или эукариотического организма. Точное воспроизведение этой информации у любого вида обеспечивает его генетическую преемственность от поколения к поколению и имеет решающее значение для нормального развития человека. Информация, хранящаяся в ДНК, организована в наследственные единицы, известные как гены, которые контролируют идентифицируемые черты организма. Открытие структуры ДНК и последующее выяснение того, как ДНК направляет синтез РНК, которая затем управляет сборкой белков — так называемая центральная догма — были монументальными достижениями, которые отметили первые дни молекулярной биологии.Однако упрощенное представление центральной догмы как ДНК → РНК → белок не отражает роли белков в синтезе нуклеиновых кислот. Более того, белки в значительной степени отвечают за регулирование репликации ДНК и экспрессии генов, всего процесса, посредством которого информация, закодированная в ДНК, декодируется в белки, которые характеризуют различные типы клеток. Двумя из этих белков являются ДНК-аденинметилтрансфераза (Dam) и ДНК-связывающий белок (SeqA).

    1.1. Метилтрансфераза Dam

    Метилирование ДНК метилтрансферазой Dam обеспечивает эпигенетический сигнал, который влияет на многочисленные физиологические процессы в бактериальной клетке и регулирует их, включая репликацию хромосом, репарацию несовпадений, транспозицию и транскрипцию.Все больше сообщений приписывают роль метилирования аденина ДНК в регулировании механизмов репликации ДНК у различных патогенов, таких как Salmonella Typhimurium и Escherichia coli ,…), предполагая, что метилирование ДНК может быть широко распространенным и универсальным регулятором этого обработать. Фермент Dam катализирует перенос метильной группы от S-аденозил-L-метионина (SAM) в положение N 6 остатка аденина в последовательностях GATC, используя переворачивание оснований для размещения основания в каталитическом сайте фермента (рис. 1).

    Рисунок 1.

    Дам катализирует перенос метильной группы от S-аденозил-L-метионина в положение N6 аденина.

    Естественным субстратом для фермента является гемиметилированная ДНК, где одна цепь метилирована, а другая нет. Это конфигурация ДНК сразу за вилкой репликации. Двухцепочечная ДНК является лучшим приемником метила, чем денатурированная ДНК, и разница в скорости метилирования между неметилированной и гемиметилированной ДНК незначительна [28].Фермент Dam, по-видимому, имеет два сайта связывания SAM; один является каталитическим сайтом, а другой увеличивает специфическое связывание с ДНК, вероятно, посредством аллостерической трансформации [13]. Полагают, что Dam связывает матрицу и осуществляет процессинг вдоль ДНК, метилируя около 55 сайтов GATC за одно событие связывания [60]. На каждую клетку Escherichia coli приходится около 130 молекул Dam, и это считается оптимальным, потому что он обеспечивает период времени между синтезом удлиненных нуклеотидных цепей и метилированием последовательностей GATC внутри них [15].Клеточный уровень Dam регулируется в основном транскрипцией; любое увеличение или уменьшение количества молекул Dam может существенно изменить физиологические свойства клетки.

    Dam конкурирует с двумя другими белками, MutH и SeqA, за сайты гемиметилированных субстратов GATC. Эти два белка действуют до Dam, чтобы участвовать в устранении ошибок репликации (MutH) и формировать компактную и правильно свернутую структуру хромосомы для нуклеоида (SeqA). Повышение клеточного уровня Dam вызывает уменьшение количества гемиметилированной ДНК и препятствует выполнению этими двумя белками своих функций, что приводит к увеличению скорости мутаций и изменению суперспирали хромосомы соответственно [27; 42; 40].Хотя Dam метилаза является ферментом с высокой процессингом, она может меньше обрабатывать сайты GATC, фланкированные специфическими последовательностями ДНК [50]. Сниженная скорость процессинга может способствовать конкуренции между Dam и специфическими ДНК-связывающими белками, что позволяет образовывать неметилированные GATC, которые зависят от фазы роста и скорости роста, предполагая, что белки, которые связываются с ними, могут участвовать в экспрессия генов или поддержание структуры хромосом. Неметилированные сайты dam, по-видимому, в основном [53] или полностью [49] модифицированы у штаммов, избыточно продуцирующих Dam, что позволяет предположить, что фермент конкурирует с другими ДНК-связывающими белками в этих специфических сайтах.В дополнение к неметилированным сайтам GATC, обсужденным выше, в хромосоме были обнаружены стойкие гемиметилированные последовательности [48; 18]. Они отличаются от временно гемиметилированных сайтов GATC, которые возникают сразу за вилкой репликации из-за задержки во времени между репликацией ДНК и метилированием Dam.

    1.2. Белок SeqA

    Белок SeqA был обнаружен у некоторых прокариот как белок, участвующий в цикле метилирования / гемиметилирования репликации ДНК [41].Этот белок регулирует активацию ориджина репликации хромосомы [41]. Эксперименты показали, что SeqA имеет высокое сродство к гемиметилированной ДНК по сравнению с полностью метилированной ДНК. Он специфически связывается с последовательностями GATC, которые метилированы на аденине старой цепи, но не на новой цепи. Такая гемиметилированная ДНК продуцируется прогрессией репликационных вилок и длится до тех пор, пока Dam метилтрансфераза не метилирует новую цепь (рис. 2). Поэтому считается, что область гемиметилированной ДНК, покрытая SeqA, следует за вилкой репликации.

    Рисунок 2.

    Спирально-фазированные сайты GATC могут связываться с SeqA, когда они находятся в гемиметилированном состоянии. Связывание SeqA ингибирует метилирование Dam, поддерживая гемиметилированное состояние на протяжении части клеточного цикла. Диссоциация SeqA позволяет Dam метилировать гемиметилированную ДНК, генерируя таким образом полностью метилированную ДНК.

    Для правильной сегрегации хромосом также требуется SeqA [5]. Более того, SeqA следует за вилкой репликации ДНК и может вносить вклад в организацию нуклеиновых кислот во вновь реплицированной ДНК [17; 37; 40; 67].Известно, что помимо своей роли в репликации хромосом и сегрегации нуклеиновых кислот, SeqA регулирует транскрипцию определенных генов. В лямбда бактериофага SeqA активирует промотор p R зависимым от метилирования GATC способом. SeqA также действует как коактиватор транскрипции, облегчая связывание фактора транскрипции c II с промоторами лямбда p I и p aQ . Было показано, что конкуренция между SeqA и репрессором OxyR за гемиметилированные сайты GATC регулирует фазовые изменения в гене Escherichia coli agn43 [51].Эти примеры повышают вероятность того, что связывание SeqA с критическими сайтами GATC может аналогичным образом регулировать экспрессию прокариотических генов, таких как Escherichia coli и Salmonella , которые являются членами семейства Enterobacteriaceae .

    1.3. Конкуренция Dam-метилазы и SeqA за сайты GATC

    Недавно синтезированная гемиметилированная ДНК также является мишенью для Dam-метилазы. Фактически, Dam и SeqA, как предполагалось, конкурируют за гемиметилированную ДНК [34].Эксперименты с несинхронизированными клетками показывают, что период секвестрации становится короче при сверхэкспрессии Dam [15; 57]. Связывание SeqA в значительной степени ограничивается гемиметилированной ДНК, и действие Dam, следовательно, трансформирует ДНК в не мишень для SeqA. Этот белок был способен связывать ДНК, несмотря на перепроизводство Dam. Недавние открытия показали, что SeqA, связанный с ДНК, не диссоциирует активно с помощью метилазы Dam [34]. То же исследование показало, что белок SeqA спонтанно отделяется от связанной ДНК через несколько минут in vitro и что повторное связывание с тем же сайтом ингибируется метилированием [34].Мы пришли к выводу, что в системе in vivo эффект перепроизводства Dam на повторное связывание SeqA должен возрастать с увеличением расстояния от репликационных вилок к началу репликации хромосомы. Это связано с тем, что чем дольше молекула SeqA была связана с ДНК, тем более вероятно ее диссоциация. Такой эффект может быть слишком мал, чтобы его можно было наблюдать при визуальном сравнении паттернов связывания SeqA. Это показывает, что Dam и SeqA находятся в постоянной конкуренции за сайты GATC in vivo , причем SeqA является значительно более сильным конкурентом.Поскольку было показано, что SeqA лучше связывается с участками ДНК с более плотно упакованными сайтами GATC, мы предположили, что такие области позволят SeqA лучше конкурировать с Dam, чем регионы с меньшим количеством сайтов GATC. Недавние данные показывают, что различия в плотности GATC имеют лишь незначительное влияние на конкуренцию SeqA против метилтрансферазы Dam [32].

    2. Репликация ДНК

    Инициирование хромосомной репликации происходит только один раз в течение клеточного цикла как у прокариот, так и у эукариот.Это начало является первым и строго контролируемым этапом синтеза ДНК. Поскольку многое из того, что известно о регуляции инициации бактериальной хромосомной репликации, получено из исследований серовара Typhimurium Escherichia coli и Salmonella enterica , данный обзор в основном посвящен регуляторным механизмам у этих видов.

    В прокариотических клетках репликация и сегрегация ДНК не являются временно разделенными процессами. Некоторые данные свидетельствуют о том, что вновь синтезированная ДНК постоянно сегрегируется в противоположных клеточных положениях [45; 52].Другая работа указывает на то, что некоторые части сегрегации могут быть более резкими и специфичными для домена [7; 21]. Координация репликации ДНК и сегрегации хромосом осложняется возможностью роста с перекрывающимися циклами репликации [19; 55]. Принимая во внимание, что во время медленного роста хромосомы реплицируются по простой схеме с помощью только одной пары вилок; репликация во время быстрого роста происходит с одной парой старых и двумя парами новых вилок на одной хромосоме. (Вилки считаются «старыми вилками», если при инициации появляются новые.) В зависимости от точных условий клетка может иметь четыре копии хромосомы с несколькими вилками и всего 24 репликационных вилки на клетку [22; 44]. Как клетка удовлетворяет очевидную потребность в эффективной организации во время такой обширной репликации, в значительной степени неизвестно. Однако белок SeqA — один из самых сильных кандидатов на участие [41; 61]. Потеря SeqA приводит к серьезным нарушениям роста во время быстрого, но не медленного роста [16]. Биохимические исследования установили, что связывание SeqA специфично для последовательности GATC с большим предпочтением гемиметилированной, а не полностью метилированной ДНК [10; 58; 11; 34].Гемиметилирование происходит на вновь реплицированных сайтах GATC, которые еще не были повторно метилированы метилазой Dam. Временное гемиметилирование после прохождения репликационной вилки было обнаружено при анализе 10 отдельных сайтов GATC [18]. Точно так же временное связывание SeqA было обнаружено в семи геномных сайтах с множественными последовательностями GATC [67]. Множественные ДНК-связанные димеры SeqA могут олигомеризоваться с образованием структуры более высокого порядка [25; 47]. Вышеприведенные данные свидетельствуют о том, что комплекс SeqA следует за вилками репликации, потенциально подобно фрезерованию протектора, увеличиваясь на ведущем конце и уменьшаясь на хвостовом конце.Уменьшение области, связанной с SeqA, в GATC, наиболее удаленных от реплисомы, будет происходить за счет активности Dam, который превращает эти сайты в нецелевые для SeqA благодаря своей активности метилирования. Описанный выше процесс называется секвестрацией ДНК.

    3. Метилирование ДНК белком Dam

    Как упоминалось выше, метилтрансфераза Dam из Enterobacteriaceae метилирует аденин в положении N 6 в последовательностях GATC. Метилирование ДНК имеет множество последствий в отношении физиологии бактерий, включая регуляцию репликации хромосом, сегрегацию ДНК, репарацию несовпадений, транспозицию и регуляцию транскрипции.Молекулярной основой плейотропных фенотипов, связанных с Dam, является дифференциальное метилирование ДНК, приводящее к измененному сродству регуляторных ДНК-связывающих белков. Регуляторные белки могут предпочтительно связываться с неметилированной ДНК, тем самым блокируя метилирование с помощью Dam, тогда как другие белки связываются с высоким сродством только с гемиметилированной или полностью метилированной ДНК [65]. Поэтому неудивительно, что Dam влияет на патогенез, экспрессию генов вирулентности, влияет на репликацию ДНК [2] и многие другие процессы [4] у микроорганизмов Salmonella .Мутантные штаммы Dam OP и dam были использованы для оценки роли метилирования ДНК в репликации ДНК. Используя эти штаммы, можно изменять паттерн метилирования в регуляторных областях генов, тем самым изменяя аффинность связывания регуляторных белков. Хотя Dam OP не отражает физиологически значимое состояние, поскольку было обнаружено, что уровни Dam в клетке остаются в основном постоянными, это функциональный инструмент для анализа влияния изменений в паттернах метилирования ДНК на экспрессию генов.Стратегии такого типа успешно использовались в течение десятилетий как у эукариот, так и у прокариот для нарушения регуляции генов в экспериментальных целях.

    4. Секвестрация ДНК белком SeqA

    Репликация бактериальной хромосомной ДНК инициируется только один раз в специфической области, известной как источник хромосомной репликации ( oriC) , белком-инициатором DnaA. Этот белок специфически взаимодействует с непалиндромными последовательностями длиной 9 пар оснований (блоками DnaA), которые существуют по адресу oriC .Чтобы гарантировать, что инициация в источнике происходит только один раз за клеточный цикл, существуют специальные механизмы для контроля хромосомной репликации. В одном механизме белок SeqA, который прочно связан с гемиметилированной ДНК с помощью механизма, известного как секвестрация, который распознает последовательности GATC, чрезмерно представленные в пределах oriC , и предпочитает связывание с гемиметилированным, а не полностью или неметилированным oriC .

    Хромосомная ДНК метилируется по остаткам аденина в последовательностях GATC с помощью метилазы Dam.После прохождения вилки репликации ДНК сайты GATC, метилированные на верхней и нижней цепях в материнской клетке (обозначенные как полностью метилированные), превращаются в два гемиметилированных дуплекса ДНК: один метилированный на верхней цепи и неметилированный на нижней цепи и один метилирован в нижней цепи и не метилирован в верхней цепи из-за полуконсервативной репликации. Большинство сайтов GATC быстро повторно метилируются ферментом Dam-метилазой и существуют в гемиметилированном состоянии только в течение части клеточного цикла (Рис. 3).

    Исключением являются ориджин репликации ДНК Escherichia coli и Salmonella typhimurium , промотор dnaA и, возможно, дополнительные сайты GATC в хромосоме, которые связывают SeqA. SeqA предпочтительно связывается с кластерами из двух или более гемиметилированных сайтов GATC, расположенных на расстоянии от одного до двух витков спирали (Рис. 4).

    В случае oriC секвестрация задерживает повторное метилирование и предотвращает связывание белка DnaA, который контролирует начало репликации ДНК.В других сайтах связывание тетрамеров SeqA с гемиметилированными сайтами GATC может организовывать нуклеиновые домены. Примечательно, что профиль транскрипции мутанта SeqA оказался сходным с профилем транскрипции штамма-сверхпродуцента Dam. На основе этого наблюдения была разработана модель, в которой Dam и SeqA конкурируют за связывание с гемиметилированной ДНК за связывание с гемиметилированной ДНК, генерируемой в репликационной вилке.

    Рисунок 3.

    Подавляющее большинство хромосомных сайтов GATC полностью метилировано до тех пор, пока репликация ДНК не генерирует два полуметилированных вида: один метилирован на верхней цепи, а другой — на нижней.В течение короткого времени после репликации (менее 5 минут) Dam метилирует неметилированный сайт GATC, регенерируя полностью метилированный сайт GATC.

    Рисунок 4.

    Два или более спирально-фазированных сайта GATC могут быть связаны с SeqA, когда они находятся в гемиметилированном состоянии. Связывание SeqA ингибирует метилирование Dam, поддерживая гемиметилированное состояние на протяжении части клеточного цикла. Диссоциация SeqA позволяет Dam метилировать гемиметилированные ДНК, генерируя полностью метилированную ДНК.

    4.1. Связывание SeqA с гемиметилированными последовательностями GATC

    Как упоминалось выше, остатки аденина в последовательностях GATC метилированы по 6-аминогруппе метилтрансферазой Dam [23; 18]. При репликации последовательности GATC на вновь реплицированной цепи временно остаются неметилированными, что приводит к полуметилированному состоянию дуплекса ДНК. Новая цепь впоследствии метилируется Dam, и дуплекс становится метилированным на обеих цепях. Инициирование репликации хромосомы в ориджине хромосомной репликации oriC , которое содержит повторяющиеся последовательности GATC, строго контролируется [43; 38].Как только инициация запущена, повторная инициация из вновь сформированного oriC предотвращается процессом секвестрации oriC , на который влияет связывание белка SeqA с вновь реплицированным, полу-метилированным ориджином [41; 34]. Гемиметилированное состояние реплицированного oriC сохраняется в течение примерно одной трети клеточного цикла, тогда как оно сохраняется в других хромосомных областях не более 2 минут. Кроме того, асинхронная и сверхинициация хромосомной репликации, характерная для мутантов seqA , указывает на то, что SeqA является негативным модулятором хромосомной инициации на oriC [41, 16].

    Топоизомераза IV необходима для декатенации и сегрегации реплицированных хромосом при делении клеток [35; 36; 1; 68; 29]. Вместе с ДНК-гиразой он также удаляет положительные суперспирали, которые накапливаются перед репликационными вилками и растущими транскриптами мРНК. Было показано, что SeqA способствует релаксации и декатенации топоизомеразы IV [33]. Это, по-видимому, является результатом специфического взаимодействия между топоизомеразой IV и SeqA. Помимо асинхронности и избыточной инициации хромосомной репликации, мутанты seqA имеют аберрантную нуклеиновую структуру, повышенную частоту аномальной сегрегации и повышенную отрицательную суперпрочность хромосомной и плазмидной ДНК [41; 30; 63; 64].Эти находки предполагают, что взаимодействие с SeqA необходимо для правильного функционирования топоизомеразы IV in vivo . Кроме того, SeqA функционирует как регулятор транскрипции промотора бактериофага pR [59].

    С-концевой участок SeqA взаимодействует посредством водородных связей и ван-дер-ваальсовых контактов с большой бороздкой ДНК, с парой гемиметилированных оснований A-T, а также с окружающими основаниями и остовом ДНК. Структура ядерного магнитного резонанса (ЯМР) гемиметилированного GATC показала, что он имеет необычную структуру основной цепи и замечательно узкую большую бороздку, и предположил, что эта специфическая структурная особенность может способствовать распознаванию гемиметилированных сайтов GATC белком SeqA [6].Чтобы сформировать стабильный комплекс SeqA-ДНК в присутствии конкурирующей ДНК, один тетрамер SeqA связывается с каждой из двух гемиметилированных последовательностей GATC [26], которые находятся на расстоянии до 31 основания в ДНК [17]. Последовательное связывание тетрамеров SeqA с гемиметилированными сайтами приводит к образованию комплексов более высокого порядка [26]. Кроме того, связывание белков SeqA по меньшей мере с шестью соседними гемиметилированными сайтами вызывает агрегацию свободных белков на связанных белках, что подразумевает кооперативное взаимодействие между белками SeqA.

    4.2. Эффекты нарушения seqA на репликацию ДНК

    Как мы уже говорили ранее, после прогрессирования репликационной вилки и синтеза зарождающейся цепи дочерняя ДНК становится гемиметилированной. Белок SeqA связывается с полуметилированными последовательностями GATC (гемисайтами) и выполняет различные роли, чтобы контролировать развитие клеточного цикла. Сразу после инициации репликации SeqA связывается с реплицированным oriC и изолирует его от реметилирования и повторной инициации репликации на реплицированном oriC .SeqA отслеживает вилки репликации как многопротеиновый комплекс и способствует поддержанию суперсильности и декатенации дочерних хромосом посредством стимуляции топоизомеразы IV и приводит к синхронной репликации.

    Когда циклам репликации разрешено завершиться, количество хромосом на клетку равно 2n (n = 0, 1, 2, 3 и т. Д.). Когда инициации являются асинхронными, как у инициирующих мутантов dnaA (Ts) при разрешающей температуре и у мутанта Escherichia coli dam [14; 56], наличие разного количества хромосомных эквивалентов (три, пять, шесть и т. Д.) был обнаружен с помощью проточной цитометрии. Наличие клеток, содержащих несколько хромосом, отличных от 2n, предполагает, что мутант seqA имеет дефект в синхронизации инициации репликации. Мутант seqA дикого типа и мутант Salmonella enterica Typhimurium, экспоненциально растущий в среде глюкоза-казаминовая кислота, обрабатывали рифампицином и цефалексином, которые блокируют инициацию репликации и деления клеток соответственно. Клетки дикого типа инициировали репликацию синхронно (количество хромосом на клетку 2n).Появление клеток с номерами хромосом, отличными от 2n, указывает на умеренную асинхронность инициации.

    Итак, анализ проточным цитометром мутантов seqA показал, что инициация репликации асинхронна и может происходить на протяжении всего клеточного цикла, а не только в нормальном возрасте клетки для инициации. Наиболее вероятная причина этого асинхронного фенотипа состоит в том, что вторичные инициации происходят во вновь реплицированных ориджинах у мутантов seqA из-за отсутствия секвестрации и неадекватного метилирования.Мы показали, что синхронность инициации зависит от интактных сайтов метилирования GATC.

    Эта потеря синхронности лишь незначительно повлияла на скорость роста культур и распределение клеток по размерам и предполагает, что мутанты seqA имеют небольшой дефект в синхронизации инициации репликации. Все эти результаты предполагают, что секвестрация ДНК играет роль в предотвращении возникновения множественных инициаций в одном ориджине в одном и том же цикле репликации. Однако с помощью проточной цитометрии мы обнаружили, что асинхронность инициации, которая является одним из фенотипов мутации seqA , вернулась почти к норме у нулевого мутанта seqA , несущего ген seqA дикого типа под геном контроль промотора tac-.

    Скорость фазы выключения в состояние включения была снижена у мутанта seqA , но большая часть этого эффекта могла быть объяснена снижением отношения Dam / ДНК, вызванным повышенным асинхронным инициированием репликации ДНК, которое происходит в отсутствие SeqA. , который обычно изолирует oriC и играет критическую роль в определении времени репликации ДНК [8].

    5. Мембранная секвестрация гемиметилированного oriC

    Координация синхронизации инициации репликации, активация белка DnaA на oriC и клеточный цикл позволяют предположить наличие очень узкого взаимодействия между бактериальной мембраной. и белок SeqA [39].Ранние исследования продемонстрировали, что мембраны способны связываться с гемиметилированным oriC in vitro и in vivo , но не с полностью метилированным или неметилированным oriC [48]. В то время как они изолированы на мембране, недавно реплицированные ориджины недоступны для повторной инициации и защищены от метилирования метилазой Dam в течение длительного периода. Истоки остаются изолированными до тех пор, пока условия в клетке не перестанут находиться в состоянии, способствующем инициированию (рис. 5).

    Рисунок 5.

    Мембранная секвестрация недавно реплицированных ориджинов [4].

    Перед инициацией репликации ДНК сайты метилазы Dam полностью метилированы. Сразу после репликации вновь синтезированная цепь неметилирована, и полученный гемиметилированный ориджин секвестрируется в липидном бислое мембраны с помощью SeqA. Это недоступно для репликативно активного ATP-DnaA. Примерно после одной трети клеточного цикла секвестрированный источник высвобождается и метилируется метилазой Dam.На этом этапе клеточного цикла уровней ATP-DnaA недостаточно, чтобы катализировать новый раунд репликации. Таким образом, секвестрация служит механизмом предотвращения вторичных инициирований. Последующая работа определила, что белок SeqA является важным фактором секвестрации oriC . Даже несмотря на то, что первые шаги очистки SeqA включают высвобождение SeqA из мембранной фракции клеточных лизатов путем обработки высокими концентрациями соли и обработки ультразвуком, первичная последовательность для белка SeqA не предполагает каких-либо очевидных ассоциированных с мембраной доменов.Это подтверждается кристаллической структурой C-концевого ДНК-связывающего домена и биохимическими исследованиями, которые показывают, что N-концевой домен служит для агрегации белка SeqA в функциональные гомотетрамеры [24]. Тем не менее, есть некоторые свидетельства того, что SeqA имеет связь с мембранами [20; 62]. Исходные данные о том, что вновь реплицированные, гемиметилированные ориджины изолированы на мембране, остаются верными. Остается неясным, происходит ли мембранная секвестрация oriC непосредственно через белок SeqA или через еще не идентифицированный фактор.

    6. Сотрудничество между «Dam» и «SeqA» в репликации ДНК

    В Escherichia coli были обнаружены стойкие гемиметилированные сайты в источнике репликации хромосомы, oriC , и в области вокруг него [18]. Эта область включает ген dnaA, расположенный в 43 т.п.н. от oriC . DnaA инициирует репликацию хромосомы путем связывания с oriC и облегчения открытия дуплекса для загрузки геликазы DnaB и голофермента ДНК-полимеразы III.Устойчивость гемиметилированного состояния обусловлена ​​высокой плотностью последовательностей GATC в oriC (11 в 245 п.н.) и в промоторной области dnaA (8 в 219 п.н.), обеспечивая множественные сайты связывания для белка SeqA. SeqA-индуцированное гемиметилированное состояние в этой области хромосомы длится около одной трети клеточного цикла (секвестрация), но механизм, с помощью которого оно устраняется, неизвестен. Целью секвестрации является предотвращение повторной инициации из или от более одного раза в клеточный цикл.Чтобы инициация происходила наиболее эффективно, промоторная область oriC и dnaA должна быть полностью метилирована. Это также способствует тому, что инициация происходит только один раз за клеточный цикл [9; 66]. В Salmonella Typhimurium SeqA может играть связанные с репликацией роли, подобные тем, которые описаны в Escherichia coli [51]. В Vibrio cholerae важны как метилирование Dam, так и SeqA [31; 54], а гиперпродукция SeqA вызывает арест репликации ДНК [54].

    В быстрорастущих клетках Escherichia coli или Salmonella Typhimurium время, необходимое для репликации хромосом, превышает время удвоения. В таких условиях клетки Escherichia coli и Salmonella Typhimurium содержат множество копий oriC из-за инициаций, произошедших два или три поколения назад. Эти источники активируются одновременно во время клеточного цикла, что приводит к синхронной инициации, которая, как полагают, происходит из-за немедленного высвобождения DnaA из источника после инициации [46].Этот выпуск временно увеличит соотношение DnaA / oriC в клетках дикого типа для оставшихся полностью метилированных источников. После инициации другие механизмы гарантируют, что DnaA не находится в надлежащей конформации для инициации. Среди этих механизмов — снижение транскрипции гена dnaA . Секвестрация с помощью SeqA после инициации поддерживает область промотора dnaA в гемиметилированном состоянии, что снижает инициацию транскрипции, поскольку последовательности GATC промотора dnaA должны быть полностью метилированы для максимальной экспрессии [9].

    В мутантных клетках dam секвестрация с помощью SeqA отсутствует; следовательно, DnaA может немедленно восстанавливать источники после первого события инициации и инициировать второй раз, когда концентрация активной формы DnaA достаточно высока. Транскрипция гена dnaA продолжается на протяжении всего клеточного цикла, хотя и на пониженном уровне. Метилирование Dam, следовательно, не существенно для инициации репликации; скорее, клетка использует метилирование, чтобы различать старое и новое происхождение.

    7. Заключение

    В семействе Enterobacteriaceae ( Salmonella Typhimurium, Escherichia coli ,…) метилирование и секвестрация ДНК модулируют различные процессы, такие как репликация ДНК и транскрипция определенных генов. Делеция генов dam и / или seqA дает множество фенотипов, от асинхронности репликации до ослабления вирулентности, что указывает на множественные функции белков Dam и SeqA в модуляции экспрессии генов, правильной сегрегации хромосом, инициации репликации хромосом и нуклеиновых стабилизация.Учитывая эти множественные роли, неудивительно, что эти мутации обладают высокой плейотропностью. Однако недостаток белков Dam и / или SeqA не влияет на жизнеспособность. Бактериальные мутантные штаммы более чувствительны к этим мутациям, чем штаммы дикого типа, которые показывают обратное. Кроме того, не наблюдали большой разницы между мутантами Salmonella Typhimurium и мутантами некоторых видов Enterobacterial , таких как Escherichia coli , при асинхронности репликации.В заключение, роль Dam и SeqA в прокариотических клеточных процессах, таких как репликация ДНК, очевидна. Таким образом, он может полагаться на их способность в качестве глобального регулятора экспрессии генов в течение жизни бактерий, in vitro , аналогично тому, как это делает in vivo .

    8. Будущие исследования

    Наши знания о влиянии белков Dam и SeqA на семейство Enterobacteriaceae ( Salmonella Typhimurium, Escherichia coli ,…) значительно улучшились за последнее десятилетие.Это фундаментальное исследование имеет несколько применений, которые окажутся полезными для разработки новых терапевтических подходов. Но на сегодняшний день терапевтические применения все еще находятся на ранней экспериментальной стадии, но несколько недавних исследований дают многообещающие результаты для будущих клинических разработок. За последние несколько лет многие исследования продемонстрировали, что Escherichia coli и Salmonella typhimurium seqA и / или dam мутанты демонстрируют асинхронную репликацию ДНК и обладают высокой степенью ослабления вирулентности у мышей и были предложены в качестве живых вакцин.Эти результаты доказывают, что эти белки могут играть роль в регуляции вирулентности. Кроме того, будущие исследования должны быть сосредоточены на изучении снижения вирулентности, протеомной и ферментативной активности мутантных штаммов seqA и / или dam . Таким образом, эти точки зрения могут быть полезны для более полного понимания значимости полученных выше результатов. Особый интерес представляют: во-первых, растущий список генов, регулируемых метилированием и секвестрацией ДНК в бактериальных патогенах; во-вторых, обнаружение новых генов, регулируемых белками Dam и SeqA, с использованием высокопроизводительного анализа, и, в-третьих, доказательства того, что эти белки могут регулировать экспрессию многих неидентифицированных генов, участвующих в репликации ДНК.

    Наконец, способ, которым Dam и SeqA явно участвуют в репликации ДНК, является критическим вопросом, который заслуживает дальнейшего изучения в ближайшем будущем, и, возможно, научные исследования должны будут найти объяснения.

    Благодарности

    Работа, представленная в этой главе, была поддержана Министерством высшего образования, научных исследований и технологий Туниса. Это было выполнено в лаборатории биохимии и молекулярной биологии, принадлежащей факультету наук Бизерты.Многие люди по-разному поддерживали меня в моей работе и внесли свой вклад в завершение этого исследования. Я особенно хотел бы выразить свою благодарность:

    Доктору Франсиско Рамос-Моралесу (Departamento de Genética, Facultad de Biologia, Universidad de Sevilla, Испания).

    Miss BCHINI Khouloud за вычитку и исправление этой рукописи.

    .

    Лаборатория 12: Выделение и идентификация Enterobacteriaceae и Pseudomonas, Часть 1

    ОБСУЖДЕНИЕ

    Лаборатории 12 и 13 имеют дело с условно-патогенными и патогенными ферментативными грамотрицательными бактериями, которые относятся к семейству бактерий Enterobacte. а также неферментативные грамотрицательные бациллы, такие как Pseudomonas и Acinetobacter .

    A. ENTEROBACTERIACEAE : ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ, ГРАМ-ОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ, КАНТЕРИЧЕСКИЕ БАЦИЛЛЫ

    Бактерии, принадлежащие к семейству Enterobacteriaceae , являются наиболее часто встречающимися организмами, выделенными из клинических образцов. Enterobacteriaceae представляет собой большое разнообразное семейство бактерий, принадлежащих к порядку Enterobacteriales в классе Gammaproteobacter филума Proteobacter . Важных с медицинской точки зрения членов этого семейства обычно называют ферментативными, грамотрицательными, кишечными палочками , поскольку они представляют собой грамотрицательных палочек , которые могут ферментировать сахара . Многие из них представляют собой нормальную флору кишечного тракта человека и животных, тогда как другие инфицируют кишечник .Члены этого семейства имеют следующие общие характеристики:

    1. Это грамотрицательных палочек (см. Рис. 1)
    2. Если они подвижны, они обладают перитриховидным расположением жгутиков (см. Рис. 2).
    3. Это факультативных анаэробов
    4. За некоторыми исключениями они являются оксидазонегативными
    5. Все виды сбраживают сахар глюкозу , но в остальном сильно различаются по своим биохимическим характеристикам.
    6. Большинство восстанавливают нитраты до нитритов. .

    Для получения дополнительной информации о стенке грамотрицательных клеток см. Следующий учебный объект в вашем Руководстве по лекциям:

    Было распознано по крайней мере сорок четыре рода и более 130 видов Enterobacteriaceae . Некоторые из наиболее распространенных клинически важных родов семейства Enterobacteriaceae включают:

    Salmonella Citrobacter Morganella
    Shigella Enterobacter76
    Proteus Serratia Edwardsiella
    Escherichia Klebsiella Providencia

    02 Несколько родов, связанных с Enterobacteria гастроэнтерит и болезни пищевого происхождения.К ним относятся:

    • Salmonella ,
    • Shigella ,
    • определенные штаммы Escherichia coli , и
    • определенные виды Yersinia .

    Все инфекции кишечного тракта передаются фекально-оральным путем .

    Существует два вида: Salmonella , Salmonella enterica и Salmonella bongori. Любая инфекция, вызванная Salmonella , называется сальмонеллезом . Нетифоидный Сальмонелла составляет около 520 случаев на 100000 населения (примерно 1600000 случаев) в год в США, и не менее 500 случаев умирают. Поскольку многие животные переносят Salmonella в своем кишечном тракте, люди обычно заражаются в результате употребления неправильно охлажденной, сырой или недоваренной птицы, яиц, мяса, молочных продуктов, овощей или фруктов , загрязненных фекалиями животных .

    Энтерит — наиболее распространенная форма сальмонеллеза. Симптомы обычно появляются через 6-48 часов после приема бактерий и включают рвоту, тошноту, диарею без крови, лихорадку, спазмы в животе, миалгии и головную боль . Симптомы обычно длятся от 2 дней до 1 недели с последующим спонтанным выздоровлением. Все виды Salmonella могут вызывать бактериемию , но S. enterica серотипа Typhi, выделенный только от человека, часто распространяется в кровь, вызывая тяжелую форму сальмонеллеза, называемую брюшным тифом.Ежегодно в США возникает около 400 случаев брюшного тифа, но примерно 75% из них приобретаются во время международных поездок.

    Salmonella серотипирование — это метод идентификации подтипов, основанный на идентификации различных антигенов клеточной стенки, жгутиков и капсул с помощью известной антисыворотки, как будет обсуждаться в лаборатории 17. Salmonella серотипов Enteritidis и Typhimurium являются двумя наиболее распространенными серотипы в Соединенных Штатах, что составляет примерно от 35 до 40% всех инфекций, подтвержденных лабораторным посевом.Как упоминалось выше, за брюшной тиф отвечает S. enterica серотипа Typhi.

    Любая инфекция Shigella называется шигеллезом . В отличие от Salmonella , которая может инфицировать множество различных животных,

    .

    Enterobakterien — Википедия

    Die Enterobakterien bzw. die Vertreter der 2016 etablierten Ordnung Enterobacterales sind eine große Gruppe innerhalb der Domäne Bacteria. Nach dem phylogenetischen System gehören sie zur Klasse der Gammaproteobacteria in der Abteilung ( Divisio , bei den Prokaryoten auch als Phylum bezeichnet) Proteobacteria und bilden dort eine eigene Ordnung.

    Vor 2016 wurde für diese Bakteriengruppe der Name «Enterobacteriales» verwendet, der jedoch nach den Regeln des Bakteriologischen Codes (ICBN) nicht gültig war.Weiterhin gab es nur eine Familie — die Enterobacteriaceae — innerhalb der Ordnung. Mit der Etablierung der Ordnung Enterobacterales verbunden ist eine Aufteilung der bisher bekannten Taxa auf mehrere neue Familien. [1] Die neue Systematik führt beispielsweise dazu, dass die Gattungen Escherichia , Morganella и Yersinia drei unterschiedlichen Familien angehören (vgl. Abschnitt Systematik).

    Der Name Enterobakterien leitet sich von enteron (altgriechisch ἕντερον ‚Darm‘) ab, weil viele von ihnen typische Darmbewohner sind.Aber auch viele freilebende und ubiquitär vorkommende, nicht darmbewohnende Bakterienarten gehören in diese Ordnung.

    Erscheinungsbild [Bearbeiten | Quelltext Bearbeiten]

    Die Zellen sind stäbchenförmig und gewöhnlich 1 до 5 мкм lang und besitzen einen Durchmesser von etwa 0,5–1,0 мкм. Es werden keine Endosporen gebildet. Die meisten können sich mit Flagellen aktiv bewegen, sie sind motil, es kommen jedoch auch Gattungen vor, die sich nicht aktiv bewegen können. Da die Zellwand aus wenigen Mureinschichten und einer zweiten, äußeren Membran aus Phospholipiden und Lipopolysacchariden besteht, sind die Enterobakterien gramnegativ.

    Stoffwechsel [Bearbeiten | Quelltext Bearbeiten]

    Ihr Stoffwechsel ist fakultativ anaerob, daher können sie sowohl über Oxidation unter Anwesenheit von Sauerstoff Stoffe abbauen, als auch unter anaeroben Bedingungen (kein Sauerstoff) Gärung betreiben. Zwei wichtige anaerobe Stoffwechselwege, die zur Unterscheidung der einzelnen Gattungen genutzt werden, sind die 2,3-Butandiol-Gärung und die gemischte Säuregärung ( смешанная кислотная ферментация ). Bei der gemischten Säuregärung treten als End- und Nebenprodukte vorwiegend Säuren, wie Essigsäure, Milchsäure und Bernsteinsäure (Succinat), aber kein Butandiol auf.Bei der 2,3-Butandiol-Gärung entstehen aus der Gärung von Gluosis als End- und Nebenprodukte geringere Mengen von Säuren, aber vor allem in großen Mengen der Alkohol 2,3-Butandiol. Ein weiteres Merkmal der 2,3-Butandiol-Gärung ist das Zwischenprodukt Acetoin und die wesentlich höhere Gasproduktion (CO 2 ). Man findet Butandiolgärung z. B. bei Enterobacter , Klebsiella , Erwinia и Serratia . Gemischte Säuregärung nutzen u. а. Gattungen wie Escherichia , Salmonella и Proteus .

    Zur Bestimmung der einzelnen Gattungen wird eine Vielzahl von Diagnosetests genutzt. Zum Beispiel wird mit Hilfe des Voges-Proskauer-Tests das Zwischenprodukt Acetoin der 2,3-Butandiol-Gärung nachgewiesen. Auch der Nachweis des Enzyms β-Galactosidase wird häufig zur Unterscheidung verwendet. Bakterien, die über dieses Enzym verfügen, können das Disaccharid Lactose (Milchzucker) hydrolytisch в моносахариде глюкоза и галактоза spalten, um sie im Stoffwechsel zu nutzen.

    Phylogenetik [Bearbeiten | Quelltext Bearbeiten]

    Durch Verwendung phylogenetischer Methoden kann die Stammesgeschichte und die verwandtschaftlichen Beziehungen der Bakterien untereinander geklärt werden.In der 2016 veröffentlichten Beschreibung der Ordnung Enterobacterales werden fünf ‚konservierte charakteristische Indels ‘(англ. сохраненных вставок и удалений подписей , CSI; Näheres dazu im Abschnitt Systematik und Taxonomie). anderen Bakterien vorkommen. Die fünf CSI kommen in den Gensequenzen vor, die für die Proteine ​​ L -Arabinose-Isomerase, Elongationsfaktor-P ähnliches Protein YeiP , Peptid-ABC-Transporter Permease, Pyrophosphatase and ein hypodierencies. [1]

    Viele Enterobakterien sind Teil der gesunden Darmflora von Menschen und Tieren; sie kommen jedoch auch überall in der Umwelt vor (Боден, Вассер). Einige sind Krankheitserreger bei Mensch und Tier. Sie kommen vielfach als nosokomiale Erreger vor («Krankenhauskeime») и befallen Menschen mit schwachem Immunsystem.

    Der wahrscheinlich wichtigste Vertreter der Enterobakterien ist Escherichia coli , einer der wichtigsten Modellorganismen der Genetik und Biochemie sowie der Mikrobiologie.Auffällig ist des Weiteren die Gattung Proteus , bei der man das sogenannte „Schwärm-Phänomen“ beobachtet. Wenn sich wachsende Kolonien dieser Bakterien auf einer Agar-Platte ausbreiten, sieht man einen Bakterienrasen mit konzentrischen Ringen.

    Verwendete Methoden der phylogenetische Systematik [Bearbeiten | Quelltext Bearbeiten]

    Bei den Vertretern der «Enterobacteriales» führten die Ergebnisse phylogenetischer Methoden der letzten Jahre, die insbesondere auf Untersuchung der 16S rRNA beruhten, ein für Prokaryoten typischer Vertreter der zrieudensomalenmalender.Daher war es das Ziel mehrerer Wissenschaftler (Adeolu et al.) Der McMaster University в Онтарио, Канада eine phylogenetische Systematik zu erstellen, die auf Vergleich von genetischen Merkmalen möglichst vieler Vertreter der Gruppe. Zum Zeitpunkt der Untersuchung (2016) содержит 14 000 Genome von 54 den Enterobakterien zugehörigen Gattungen in der Genomdatenbank des Nationalen Zentrums für Biotechnologieinformation (NCBI) verfügbar. Für die Analyze wurden 179 представитель Genomsequenzen herangezogen und verschiedene molkularer Marker ausgesucht und verglichen, um jeweils einen phylogenetischen Baum zu erstellen, der die evolutionären Beziehungen zwischen den Vertretern der. [1]

    Zum einen wurden dafür 1548 Hauptproteine ​​herangezogen, die typisch für die Gruppe sind und DNA-Sequenzen verglichen, die für die Proteine ​​codieren. Аналог dazu wurden 53 рибосомальный протеин (rProteine) verwendet und weiterhin wurde die DNA-Sequenzanalyse von mehreren Loci (MLSA), die für vier Proteine ​​codieren, durchgeführt. Bei den Proteinen обрабатывает GyrB (Gyrase B), RpoB , AtpD и InfB . Die so konstruierten drei phylogenetischen Bäume ergeben ein einheitliches Bild mit jeweils sieben Kladen, die als Enterobacter-Escherichia -Klade, Erwinia-Pantoea -Klade, -Keadeinia- Pectobacterium- Pectobacteria0008 Hafnia-Edwardsiella -Klade, Proteus-Xenorhabdus -Klade und Budvicia -Klade bezeichnet werden.Darauf basierend wird die Ordnung Enterobacterales mit sieben Familien Definiert (eine weitere Familie, die Thorselliaceae, wurde durch eine andere Gruppe von Wissenschaftlern erstbeschrieben). Das Ergebnis dieser phylogenetischen Analyze wird durch die Resultate der Analyze der Genomverwandtschaft unterstützt. Diese Methode erfolgt ebenfalls in silico (computerbasiert) как Ersatz für die DNA-DNA-Hybridisierung und ist hilfreich für die Einordnung taxonomisch höherer Rangstufen. [1]

    Die Genomanalyse ermöglicht auch das Entdecken bzw.Festlegen von ‚konservierten (bewahrten) molkularen Eigenschaften‘, die sich innerhalb einer Gruppe von nah miteinander verwandten Organismen nicht oder kaum voneinander unterscheiden, während sie sich bei Evolution Gruppeiner ande. Für die phylogenetische Systematik der Prokaryoten werden dazu ‚konservierte charakteristische Indels‘ (англ. консервативные вставки и делеции сигнатур , CSI) verwendet. Gruppenspezifische CSI sind charakteristisch für ein bestimmtes Taxon (beispielsweise eine Ordnung), da sie in allen Vertretern dieser Gruppe und nicht in anderen Gruppen auftreten.Das ursprüngliche Indel eines gruppenspezifischen CSI trat vermutlich bereits vor der Aufspaltung im letzten gemeinsamen Vorfahren auf und wurde von den daraus entstandenen Vertretern der Gruppe übernommen («vererbt»). [2] Ein weiteres wichtiges Ergebnis der Untersuchung von Adeolu et al. ist die Entdeckung von 71 CSI, darunter fünf, die einzigartig für all Vertreter der Ordnung Enterobacterales sind und daher für ihre Beschreibung verwendet werden. Die übrigen 66 CSI sind spezifisch für die sieben Gruppen und können bei zukünftigen Genomanalysen von neu entdeckten Spezies der Enterobakterien für deren systematische Klassifikation verwendet werden. [1]

    Kladogramm zu den Verwandtschaftsverhältnissen innerhalb der Ordnung Enterobacterales (стенд 2016) [1]
    Das Kladogramm gibt die Anzahl der dazugehörigen konservierten charakteristischen Indels (CSI) an. Die Familie der Thorselliaceae ist nicht enthalten.

    Das Ergebnis der umfangreichen genomweiten Analysen aus dem Jahr 2016 ist die im Folgenden dargestellte Systematik.

    Nomenklatur und Taxonomie der Ordnung [Bearbeiten | Quelltext Bearbeiten]

    Die Gattung Enterobacter ist nicht die Typusgattung der Familie Enterobacteriacea, dies ist die Gattung Escherichia . Damit wird von der festgelegten Nomenklatur gemäß dem Bakteriologischen Code (Международный кодекс номенклатуры бактерий) abgewichen, был проведен в 1958 году на фестивале Судебное заключение 15 der Judicial Commission, der der (in et al.) Internationalen Kommission für die Systematik der Prokaryoten (Международный комитет по систематике прокариот, ICSP) bestätigt wurde. [3] Nach den Regeln des Bakteriologischen Codes müsste eine Ordnung mit der Typusgattung Escherichia folglich «Escherichiales» genannt werden, eine Ordnung mit der Typusgattung Enterobacter «genetactera nüsstere». [4] Um die Akzeptanz der neuen Systematik sicherzustellen und die mögliche Verwirrung bei Benennung der Ordnung als «Escherichiales» zu vermeiden, wurde der Name Enterobacterales ord.ноя mit der Typusgattung Enterobacter gewählt. [1]

    Aktuelle Systematik [Bearbeiten | Quelltext Bearbeiten]

    Zu der 2016 etablierten Ordnung der Enterobacterales gehören acht Familien mit insgesamt etwa 60 Gattungen. [1] [5] [6] Die neu festgelegte und damit den Regeln des Bakteriologischen Codes (ICBN) entsprechende Typusgattung der Ordnung ist die Gattung Enterobacter . Die Beschreibung der Ordnung Enterobacterales Adeolu et al.2016 орд. ноя Entspricht der Beschreibung der Familie der Enterobacteriaceae im Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology von 2005, mit der Erweiterung, dass die Vertreter der Ordnung von allen anderen Bakterien durch fünf CSI unterschieden werden können. [1]

    Die Gattung Phytobacter Zhang et al. 2017 исправление. Pillonetto et al. 2018 wurde bisher keiner Familie zugeordnet.

    Im Folgenden eine Auflistung der zugehörigen Familien mit Nennung den meisten der dazugehörigen Arten (стенд 2019). [6]

    • Budviciaceae Adeolu et al. 2016, сем. ноя
      • Budvicia Bouvet et al. 1985 исправить. Lang et al. 2013, Typusgattung der Familie
      • Leminorella Hickman-Brenner et al. 1985
      • Pragia Aldová et al. 1988

    Klebsiella pneumoniae
    (sekundärelektronenmikroskopische Aufnahme)
    Sekundärelektronenmikroskopaufnahme von Salmonellen (rot eingefärbt)
    Kolonien von Morganella morganii auf Blutagar
    Lichtmikroskopisches Bild von Yersinia enterocolitica nach Gram-Färbung

    Einige Synonyme und Umstellungen [Bearbeiten | Quelltext Bearbeiten]

    • Alle Arten von Levinea Young et al.1971 wurden zu der Gattung Citrobacter Werkman & Gillen 1932 gestellt
    • Verschiedene Erwinia -Arten wurden in die Gattungen Pantoea , Enterobacter , Pectobacterium и Brenneria aufgeteilt
    • Liquidobacterium ist ein Синоним для Proteus

    In Deutschland ist der direkte Nachweis von Enterobacterales namentlich meldepflichtig nach § 7 des Infektionsschutzgesetzes (IfSG), aber nur bei Nachweis einer Carbapenemase-Determinante oder au genzücherempfenesempfineempfene.Die Meldepflicht besteht nur bei Infektion oder Kolonisation. (§ 7 Абс.1 Satz 1 Nr. 52 b) IfSG)

    Zudem ist das Auftreten von zwei oder mehr nosokomialen Infektionen nichtnamentlich zu melden, bei denen ein epidemischer Zusammenhang wahrscheinlich ist oder vermutet wird. (§ 6 Absatz 3 IfSG).

    Literatur [Bearbeiten | Quelltext Bearbeiten]

    • Том 6: Протеобактерии: гамма подкласс . В: Мартин Дворкин, Стэнли Фалькоу, Юджин Розенберг, Карл-Хайнц Шлейфер, Эрко Стакебрандт (Hrsg.): Прокариоты. Справочник по биологии бактерий . 3. Auflage. Springer-Verlag, Нью-Йорк 2006, ISBN 978-0-387-25496-8, DOI: 10.1007 / 0-387-30746-X_9.
    • Дон Дж. Бреннер, Дж. Дж. Фармер III: Семейство I. Enterobacteriaceae . В: Джордж М. Гаррити, Дон Дж. Бреннер, Ноэль Р. Криг, Джеймс Т. Стейли (Hrsg.): Руководство Берджи по систематической бактериологии: Том 2: Протеобактерии, Часть B: Гаммапротеобактерии . 2. Auflage. Springer-Verlag, Нью-Йорк 2005, ISBN 978-0-387-95040-2, S.587–607.
    • Майкл Т. Мэдиган, Джон М. Мартинко, Джек Паркер: Брок — Mikrobiologie , Spektrum Akademischer Verlag, Гейдельберг, Берлин 2001, ISBN 3-8274-0566-1

    Einzelnachweise [Bearbeiten | Quelltext Bearbeiten]

    1. a b c d e f g h i M. Adeolu, S. Alnajar, S. Naushad, RS Gupta: Филогения на основе генома и таксономия «Enterobacteriales»: предложение по Enterobacterales ord.ноя разделены на семейства Enterobacteriaceae, Erwiniaceae fam. nov., Pectobacteriaceae fam. nov., Yersiniaceae fam. nov., Hafniaceae fam. nov., Morganellaceae fam. nov. и Budviciaceae fam. ноя В: Международный журнал систематической и эволюционной микробиологии. № 66, декабрь 2016 г., S. 5575–5599, DOI: 10.1099 / ijsem.0.001485.
    2. ↑ Radhey S. Gupta, Emma Griffiths: Critical Issues in Bacterial Phylogeny. In: Теоретическая популяционная биология. № 61, июнь 2002 г., S. 423–434, DOI: 10.1006 / tpbi.2002.1589, PMID 12167362.
    3. ↑ Jean Euzéby, Aidan C. Parte: Genus Enterobacter. In: Список названий прокариот, стоящих в номенклатуре, Systematik der Bakterien (LPSN). Абгеруфен утра 20. Декабрь 2019.
    4. ↑ С. П. Лапаж, П. Х. А. Снит, Э. Ф. Лессел, В. Б. Д. Скерман, Х. П. Р. Силигер, В. А. Кларк (Hrsg.): Международный кодекс номенклатуры бактерий — Бактериологический кодекс, версия 1990 г.ASM Press, Вашингтон (округ Колумбия), США, 1992, ISBN 1-55581-039-X (Книжная полка NCBI).
    5. ↑ П. Кемпфер, С. П. Глезер, Л. К. Дж. Нильссон, Т. Эберхард, С. Хоканссон, Л. Гай, С. Роос, Х.-Дж. Буссе, О. Терениус: Предложение Thorsellia kenyensis sp. ноя и Thorsellia kandunguensis sp. nov., выделенные из личинок Anopheles arabiensis, как представители семейства Thorselliaceae fam. ноя В: Международный журнал систематической и эволюционной микробиологии. № 65, февраль 2015, S.444–451, DOI: 10.1099 / ijs.0.070292-0.
    6. a b Jean Euzéby, Aidan C. Parte: Классификация доменов и типов — Иерархическая классификация прокариот (бактерий). In: Список названий прокариот, стоящих в номенклатуре, Systematik der Bakterien (LPSN). Абгеруфен утра 20. Декабрь 2019.

    .

    Энтеробактер | Описание, характеристики, виды и устойчивость к лекарствам

    Enterobacter , (род Enterobacter ), любая из группы палочковидных бактерий семейства Enterobacteriaceae. Enterobacter — грамотрицательные бактерии, которые классифицируются как факультативные анаэробы, что означает, что они могут процветать как в аэробной, так и в анаэробной среде. Многие виды обладают жгутиками и поэтому подвижны. Такие характеристики, как подвижность, а также определенные биохимические свойства, включая способность синтезировать фермент, известный как орнитиндекарбоксилаза, используются для отличия Enterobacter от очень похожих и близкородственных бактерий Klebsiella . Enterobacter назван в честь преобладающей естественной среды обитания организмов, кишечника животных (от греческого enteron , что означает «кишечник»).

    Enterobacter в природе повсеместны; их присутствие в кишечном тракте животных приводит к их широкому распространению в почве, воде и сточных водах. Также они содержатся в растениях. Известно, что у человека несколько видов Enterobacter действуют как условно-патогенные микроорганизмы (болезнетворные организмы), включая E.cloacae , E. aerogenes , E. gergoviae и E. agglomerans . Патогенный Enterobacter может вызывать любое из множества состояний, включая инфекции глаз и кожи, менингит, бактериемию (бактериальную инфекцию крови), пневмонию и инфекции мочевыводящих путей. Во многих случаях заболевание, вызываемое E. cloacae или E. aerogenes , связано с воздействием этих организмов в нозокомиальных условиях, таких как больницы или дома престарелых.

    Появление устойчивых к лекарствам организмов Enterobacter усложнило режимы лечения, особенно в нозокомиальных условиях, где такие организмы становятся все более распространенными. Традиционные подходы к лечению инфекций Enterobacter включают монотерапию противомикробными препаратами, обычно с аминогликозидом, фторхинолоном, цефалоспорином или имипенемом. Однако в некоторых случаях субпопуляции Enterobacter способны продуцировать ферменты, известные как бета-лактамазы, которые расщепляют центральную кольцевую структуру, отвечающую за активность бета-лактамных антибиотиков, группу, которая включает имипенем (тип карбапенема) и цефалоспорины.Повторное воздействие этих препаратов приводит к селекции на синтезирующую бета-лактамазу Enterobacter , тем самым вызывая лекарственную устойчивость, в том числе против карбапенемов, которые когда-то были высокоэффективными против организмов с множественной лекарственной устойчивостью. В новых подходах к инфекциям Enterobacter были приняты схемы комбинированной терапии, в которых используются несколько антибиотиков с различными основными структурами, такие как аминогликозид или фторхинолон в комбинации с бета-лактамным агентом. Однако, несмотря на обещание этой более разнообразной стратегии, она была связана с отбором организмов с множественной лекарственной устойчивостью.

    Устойчивость Enterobacter к небета-лактамным антибиотикам, включая фторхинолоны, такие как ципрофлоксацин, включает различные клеточные и генетические механизмы. Примеры бактерий, использующих такие механизмы, включают устойчивые к ципрофлоксацину E. aerogenes и устойчивые к множественным лекарствам E. aerogenes , которые во многих случаях устойчивы к ципрофлоксацину и имипенему. У организмов Enterobacter , устойчивых к аминогликозидам, устойчивость была связана с бактериальным генетическим элементом, известным как интегрон.Интегроны содержат гены, которые придают устойчивость к антибиотикам и встраиваются в бактериальные геномы посредством генетической рекомбинации. Они эффективно обмениваются и распространяются среди циркулирующих популяций бактерий, например, в нозокомиальной среде. В E. cloacae устойчивость к аминогликозиду гентамицину была приписана присутствию интегронов в геноме организма.

    Britannica Premium: удовлетворение растущих потребностей искателей знаний.Получите 30% подписки сегодня.
    Подпишись сейчас

    Свободноживущие Enterobacter способны к азотфиксации. Определенные виды, в частности E. cloacae , участвуют в симбиотической фиксации азота в растениях и были выделены из корневых клубеньков некоторых сельскохозяйственных культур, таких как пшеница и сорго, а также из ризосфер риса.

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *